广东志珞生物科技有限公司韩振宇获国家专利权
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龙图腾网获悉广东志珞生物科技有限公司申请的专利一种NK细胞及其在制备抗肿瘤药物中的用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119876018B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-01-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411845309.0,技术领域涉及:C12N5/0783;该发明授权一种NK细胞及其在制备抗肿瘤药物中的用途是由韩振宇;张朝东设计研发完成,并于2024-12-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种NK细胞及其在制备抗肿瘤药物中的用途在说明书摘要公布了:本发明提供了一种NK细胞的分离、培养、激活及其在肿瘤免疫中的应用方法。该方法包括从健康成人外周血中分离单核细胞,并通过负选择法去除非NK细胞群体,富集纯化NK细胞。通过特定的细胞因子的刺激,成功扩增NK细胞并激活其细胞毒性。本发明通过优化NK细胞的制备与激活方法,在体外获得了具有高效杀伤活性的NK细胞,并通过与免疫检查点抑制剂联合使用,显著提高了肿瘤治疗效果。结合NK细胞的免疫记忆效应,本发明提供了一种新的抗肿瘤免疫治疗方法,并可应用于制备新的抗肿瘤药物,为肿瘤治疗提供了创新的思路。
本发明授权一种NK细胞及其在制备抗肿瘤药物中的用途在权利要求书中公布了:1.一种NK细胞的分离、培养、激活的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤: 1分离NK细胞:通过Ficoll-Hypaque梯度离心法从健康成人外周血中分离单核细胞,并利用负选择法去除T细胞、B细胞和单核细胞,从而富集NK细胞群体; 2培养NK细胞:将分选后的NK细胞接种在RPMI-1640培养基中,加入10%胎牛血清和1%青霉素链霉素,同时添加50IUmL的IL-2和10ngmL的IL-15进行扩增,培养14天,每3天更换一次培养基; 3激活NK细胞:在培养第7天,添加10ngmL的IL-21和5ngmL的IL-12,联合刺激NK细胞,增强其细胞毒性; 4肿瘤抗原诱导激活:在第7天细胞因子激活后,收集培养的NK细胞,在激活后的NK细胞中加入肿瘤抗原刺激;并在第10天,添加抗CD16单克隆抗体进一步增强NK细胞的杀伤能力;所述的肿瘤抗原为MC-38结肠癌细胞,其中MC-38结肠癌细胞约1×106个mL,并与NK细胞按照1:1的比例混合,将细胞混合物接种到培养皿中,补充完整RPMI-1640培养基,确保细胞充分接触并共同培养48小时,以评估NK细胞的抗肿瘤效果;所述抗CD16单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。
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