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龙图腾网获悉内蒙古农业大学申请的专利一种基于CRISPR-Cas12a技术检测副结核分枝杆菌的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120843659B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511358991.5，技术领域涉及：C12Q1/686；该发明授权一种基于CRISPR-Cas12a技术检测副结核分枝杆菌的方法是由刘永宏;吕月融;赵丽;张荣;薛仕元;刘依杨;杨波;斯庆图娜拉;曹芳;李宏;陈瑞斌;哈斯巴雅尔;阿拉腾巴根;吉雅图设计研发完成，并于2025-09-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于CRISPR-Cas12a技术检测副结核分枝杆菌的方法在说明书摘要公布了：本发明属于核酸检测领域，公开一种基于CRISPR‑Cas12a技术检测副结核分枝杆菌的方法。针对现有MAP检测方法耗时、成本高、灵敏性和特异性低，及现有CRISPR技术适配性差、低载菌量检出不足等问题，该方法结合重组酶聚合酶扩增RPA与巢式聚合酶链式反应PCR，以MAP高保守基因组序列为靶标，融合核酸扩增高灵敏度与CRISPR‑Cas12a高特异性、信号放大能力。其最低检出限达10−20−20M，远超传统PCR或CRISPR单独使用效果，实现超灵敏、高特异性、快速低成本检测，适用于副结核病早期感染或低载菌量样品检测。

本发明授权一种基于CRISPR-Cas12a技术检测副结核分枝杆菌的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于CRISPR-Cas12a技术检测副结核分枝杆菌的方法在环境样本或食品样本中检测副结核分枝杆菌核酸中的应用，以评估环境或食品的卫生状况，其特征在于，所述方法为非疾病诊断目的的方法，包括以下步骤： S1、提供待测样品，所述待测样品为环境样本或食品样本； S2、从所述待测样品中提取总DNA； S3、采用巢式聚合酶链式反应体系扩增靶标核酸序列；所述巢式聚合酶链式反应体系包括：上游引物，其核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；下游引物，其核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；内上游引物，其核苷酸序列如SEQIDNO.5所示；内下游引物，其核苷酸序列如SEQIDNO.6所示； S4、配制CRISPR-Cas12a反应体系，所述反应体系包括Cas12a蛋白、靶标向导RNA、检测探针和缓冲液； 所述靶标向导RNA包括与Cas12a蛋白结合的区域和与靶标核酸序列杂交的导向序列，所述检测探针为荧光探针；所述靶标向导RNA的导向序列如SEQIDNO.7所示； S5、将扩增后的靶标核酸序列加入所述CRISPR-Cas12a反应体系中，所述靶标向导RNA引导所述Cas12a蛋白特异性结合所述靶标核酸序列，激活所述Cas12a蛋白的反式切割活性，切割所述检测探针，产生可检测信号； S6、检测所述可检测信号，计算所述靶标核酸序列的含量，从而评估环境或食品的卫生状况； 所述CRISPR-Cas12a反应体系利用靶标向导RNA引导Cas12a蛋白特异性结合靶DNA的PAM序列5'-TTTV-3'，形成R-loop结构激活酶活性，顺式切割靶DNA双链产生黏性末端，同步触发反式切割活性，无差别降解体系中的单链核酸，实现靶标检测的信号放大。

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