华中科技大学朱斌获国家专利权
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龙图腾网获悉华中科技大学申请的专利一种快速获得未知核酸内切酶切割模式的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114836525B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110137807.X,技术领域涉及:C12Q1/6869;该发明授权一种快速获得未知核酸内切酶切割模式的方法是由朱斌;成锐设计研发完成,并于2021-02-01向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种快速获得未知核酸内切酶切割模式的方法在说明书摘要公布了:本发明公开一种快速获得未知核酸内切酶切割模式的方法,先将未知核酸内切酶切割得到的DNA片段经过处理后连入T载体,测序引物分别向连接产物的连接位点方向进行测序,使得测序结果覆盖底物DNA的断裂位置,然后根据外源DNA片段即原始DNA片段序列与紧邻的T载体边界的序列信息,经过序列比对分析,即可准确推断出底物DNA片段的断裂位置以及断裂方式,因而可用于未知核酸酶的识别位点测定,具有操作简单快速、结果准确、成本低、耗时短等优点。
本发明授权一种快速获得未知核酸内切酶切割模式的方法在权利要求书中公布了:1.一种快速获得未知核酸内切酶切割模式的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1.将长度为300-2000bp的DNA底物用未知核酸酶特异性切割,得到若干原始DNA片段,并进行切胶回收; S2.对步骤S1中回收得到的原始DNA片段进行末端平齐化和去磷酸化处理; S3.将步骤S2中处理得到的DNA片段连入T载体,并将连接有T载体的DNA片段转化到宿主菌中; S4.筛选得到阳性重组子,利用T载体上的测序引物分别向连接位点方向进行测序;根据T载体边界序列以及与之紧邻的DNA片段序列,推断出原始DNA片段的断裂位置和断裂方式,即得到未知核酸内切酶的切割模式; 所述测序引物为T载体上的任一段序列,且所述测序引物的第一个碱基与所述连接位点之间的距离为50-800bp。
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