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龙图腾网获悉上海迪赢生物科技有限公司申请的专利一种超高通量多重PCR扩增子捕获方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114958991B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210687838.7，技术领域涉及：C12Q1/686；该发明授权一种超高通量多重PCR扩增子捕获方法是由孔育权;李耕慧;胡征设计研发完成，并于2022-06-17向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种超高通量多重PCR扩增子捕获方法在说明书摘要公布了：本发明涉及二代测序领域，具体是一种用于二代测序的超高通量多重PCR扩增子捕获方法，所述NGS捕获方法包括以下步骤：1利用包含可消化复合修饰引物对待检测的样本进行多重PCR扩增，得到PCR产物；2利用包含引物消化酶、纠错酶和末端修复酶的第二酶混液对PCR产物进行酶切反应，包括用于消化酶去除扩增产物上多余引物部分，利用错配纠错酶去除非特异扩增产物；3利用包含Index的全长接头进行连接反应，直接得到测序用的文库或者扩增后得到测序用文库。本发明的方法显著提高了扩增效率和特异性，而且步骤简单、成本低、时间短，在遗传病检测、肿瘤伴随诊断等基因检测和科学研究领域有广泛应用价值。

本发明授权一种超高通量多重PCR扩增子捕获方法在权利要求书中公布了：1.一种超高通量多重PCR扩增子捕获方法，其特征在于，所述超高通量多重PCR扩增子捕获方法包括以下步骤： 1利用包含可消化复合修饰的扩增引物池和第一酶混液对待检测的样本进行多重PCR扩增，得到扩增子产物；所述扩增引物池中的扩增引物至少有一条包含复合修饰碱基核苷酸，且修饰方式存在下列中的一种或几种情况：T碱基替换为尿嘧啶修饰碱基，T碱基替换为锁核苷酸胸腺嘧啶修饰碱基，T碱基替换为5甲基胞嘧啶修饰碱基，T碱基替换为锁核苷酸腺嘌呤修饰碱基，G碱基替换为8‑羟基脱氧鸟苷修饰碱基，和T碱基替换为次黄嘌呤修饰碱基； 所述第一酶混液为QuarTaq HotStart混合液； 2利用包含引物消化酶、错配纠错酶和末端修复酶的第二酶混液对扩增子产物进行酶切反应，包括用引物消化酶去除扩增产物上多余引物部分，利用错配纠错酶去除非特异扩增产物；所述第二酶混液包括引物消化酶、错配纠错酶、T4多聚核苷酸激酶、Taq聚合酶和QuarPrep末端修复加尾缓冲液；所述引物消化酶选自UDG酶和FPG酶中的一种或两种；所述错配纠错酶选自T7核酸内切酶I、T4核酸内切酶VII、E coli核酸内切酶V、Surveror核酸内切酶和CEL I核酸内切酶中的一种或几种； 3利用包含Index的全长接头和第三酶液进行连接反应，直接得到测序用的文库或者扩增后得到测序用文库；所述第三酶液为DNA连接酶； 对于任一条包含复合修饰碱基核苷酸的扩增引物，其被修饰的碱基数量为0到n之间的任一整数，n代表该条扩增引物总长度； 利用包含Index的全长接头和第三酶液进行连接反应后直接得到测序用文库； 所述错配纠错酶用于降低PCR扩增产生的非特异； 所述包含Index的全长接头替代通用短接头进行连接反应构建测序用文库； 所述待检测的样本选自原核或真核微生物基因组、动物或植物基因组或人基因组； 所述扩增引物池包含如SEQ ID NO:1‑262所示的引物。

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