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中国科学院天津工业生物技术研究所王钦宏获国家专利权

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龙图腾网获悉中国科学院天津工业生物技术研究所申请的专利生产2-吡喃酮-4, 6-二羧酸大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115466706B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210626629.1,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权生产2-吡喃酮-4, 6-二羧酸大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用是由王钦宏;吴凤礼;周丹;张媛媛;江小龙;陈五九;彭彦峰设计研发完成,并于2022-05-16向国家知识产权局提交的专利申请。

生产2-吡喃酮-4, 6-二羧酸大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用在说明书摘要公布了:本发明提供一种生产2‑吡喃酮‑4,6‑二羧酸的大肠杆菌EscherichiacoliEscherichiacoli重组菌株,其通过在生产3‑脱氢莽草酸重组菌株的基因组上过表达外源3‑脱氢莽草酸脱水酶基因,或进一步过表达原儿茶酸‑4,5‑二氧化酶基因,或更进一步过表达4‑羧基‑2‑羟基粘康酸‑6‑半醛脱氢酶基因,而实现高效从头合成2‑吡喃酮‑4,6‑二羧酸。该菌株利用无机盐培养基,以葡萄糖为碳源,通过分批补料发酵生产2‑吡喃酮‑4,6‑二羧酸,生产成本低,且上述重组菌株不含质粒,遗传稳定性强。

本发明授权生产2-吡喃酮-4, 6-二羧酸大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用在权利要求书中公布了:1.生产2‑吡喃酮‑4,6‑二羧酸的重组大肠杆菌Escherichia coli,其特征在于,出发大肠杆菌是保藏编号为CGMCC No.14602的大肠杆菌WJ060菌株,所述重组大肠杆菌是通过下述基因改造获得: 在产3‑脱氢莽草酸的出发大肠杆菌中整合过表达外源3‑脱氢莽草酸脱水酶基因,且替换WJ060菌株基因组上的丙酮酸甲酸裂解酶基因pflB;其中3‑脱氢莽草酸脱水酶是pET30a‑quiC质粒上的quiC基因所编码的蛋白; 过表达原儿茶酸‑4,5‑二氧化酶基因,其编码α和β两个亚基构成的蛋白,α和β亚基的氨基酸序列的NCBI登录号分别为MBO9517659.1和MBO9517658.1,且整合至WJ060菌株基因组上ykgH‑betA两个基因中间的非编码区; 过表达4‑羧基‑2‑羟基粘康酸‑6‑半醛脱氢酶编码基因,其编码蛋白如NCBI上登录号为MBO9517657.1,且替换WJ060菌株基因组上的D‑乳酸脱氢酶基因ldhA; 用调控元件P2上调3‑脱氢莽草酸脱水酶基因的表达,所述P2位于3‑脱氢莽草酸脱水酶基因起始密码子ATG上游,其序列如SEQ ID NO:10所示; 用调控元件P4上调原儿茶酸‑4,5‑二氧化酶基因的表达,所述P4位于原儿茶酸‑4,5‑二氧化酶基因起始密码子ATG上游,其序列如SEQ ID NO:11所示; 用调控元件P4上调4‑羧基‑2‑羟基粘康酸‑6‑半醛脱氢酶基因的表达,所述P4位于4‑羧基‑2‑羟基粘康酸‑6‑半醛脱氢酶基因起始密码子ATG上游,其序列如SEQ ID NO:11所示; 还通过在大肠杆菌基因组上整合第二个拷贝的4‑羧基‑2‑羟基粘康酸‑6‑半醛脱氢酶基因PsligC; 其通过在基因组上ypjC‑ileY两个基因中间整合第二个拷贝的4‑羧基‑2‑羟基粘康酸‑6‑半醛脱氢酶基因PsligC,并用调控元件P4上调PsligC的表达,所述PsligC序列如SEQ ID NO:5所示;所述P4位于PsligC起始密码子ATG上游,其序列如SEQ ID NO:11所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国科学院天津工业生物技术研究所,其通讯地址为:300450 天津市滨海新区空港经济区西七道32号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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