买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉福建洛东生物技术有限公司;重庆三峡职业学院申请的专利一种表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119614471B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411805442.3，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一种表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用是由刘明刚;肖丹;戴茜茜;潘康成;郭勇山;林雅琳;严贤城;陈嘉慧设计研发完成，并于2024-12-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用在说明书摘要公布了：本发明公开一种表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用，以芽孢衣壳蛋白CotY为锚点，将OmpA和CTB的编码基因同源双交叉重组至枯草芽孢杆菌168的基因组内，获得能在枯草芽孢杆菌内稳定遗传且在芽孢表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA和霍乱弧菌肠毒素CTB的重组枯草芽孢杆菌；鱼类和哺乳动物口服免疫该菌后显著提高机体感染迟缓爱德华氏菌后的存活时间及存活率；该重组枯草芽孢杆菌作为鱼类和哺乳动物防治迟缓爱德华氏菌感染的口服疫苗型微生态免疫制剂，显著简化免疫程序、降低免疫应激、节约劳动成本、保证肠道内的有效作用浓度，诱导机体产生特异性的免疫反应。

本发明授权一种表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌、构建方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌是以芽孢衣壳蛋白CotY为锚点，运用化学转化法将OmpA和CTB的编码基因同源双交叉重组至枯草芽孢杆菌168的基因组内，获得的能够在枯草芽孢杆菌内稳定遗传且在芽孢表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA和霍乱弧菌肠毒素CTB的重组枯草芽孢杆菌； 所述重组枯草芽孢杆菌的构建方法包括以下步骤： 步骤S1： 以枯草芽孢杆菌168的基因组为模板，以cotY‑F和cotY‑R为引物，在上下游引物的5’端分别引入Bam HI与Hind Ⅲ酶切位点，对应位点用下划线表示；对编码芽孢衣壳蛋白CotY含启动子的编码基因cotY进行PCR扩增，获得的PCR产物序列见序列表SEQ ID NO.3；将PCR产物连接于pMD™19 Simple载体并转化至感受态细胞中克隆，获得重组质粒pMD‑cotY； 所述引物如下所示： cotY‑F：[5’‑ CGGGATCCTGACTGTGACCATCCGTTAG‑3’]，即为SEQ ID NO.1cotY‑R：[5’‑ CGAAGCTTTCCATTGTGATGATGCTTTTTA‑3’]，即为SEQ ID NO.2； 步骤S2： 运用基因合成和T‑A克隆的方式，将编码霍乱弧菌肠毒素B亚基的基因片段，通过连接子连接于ompA基因的3’端，形成串联的ompA‑linker‑ctB基因片段，并在序列的5’端引入Hind Ⅲ酶切位点，3’端引入终止密码子“TAA”和EcoR Ⅰ酶切位点，连接于pMD™19 Simple载体，并转化至感受态细胞中克隆，获得重组质粒pMD‑ompA‑linker‑ctB； 所述编码霍乱弧菌肠毒素B亚基的基因片段的Gene ID为U25679.1，序列如SEQ ID NO.7所示； 步骤S3： 使用Bam HI与Hind Ⅲ分别双酶切整合型质粒pDG364和重组质粒pMD‑cotY，将酶切获得的cotY片段与pDG364相连，并转化至感受态细胞中克隆，获得重组整合型质粒pDG364‑cotY； 步骤S4： 使用Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ分别双酶切重组整合型质粒pDG364‑cotY和重组质粒pMD‑ompA‑linker‑ctB，将酶切获得的ompA‑linker‑ctB片段与pDG364‑cotY相连，转化至感受态细胞中克隆，获得重组整合型质粒pDG364‑cotY‑ompA‑linker‑ctB； 步骤S5： 使用限制性内切酶 Xba I对重组整合型质粒pDG364‑cotY‑ompA‑linker‑ctB进行单酶切线性化，通过化学转化法将线性质粒转入野生型枯草芽孢杆菌168的感受态细胞内，以淀粉酶的编码基因amyE为同源双交叉重组位点，将cotY‑ompA‑linker‑ctB片段插入枯草芽孢杆菌168的基因组内，获得所述表面展示迟缓爱德华氏菌外膜蛋白OmpA与霍乱弧菌肠毒素CTB融合蛋白的重组枯草芽孢杆菌； 所述步骤S2中连接子序列如SEQ ID NO.8所示；所述串联的ompA‑linker‑ctB基因片段如SEQ ID NO.9所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人福建洛东生物技术有限公司;重庆三峡职业学院，其通讯地址为：351162 福建省莆田市城厢区灵川镇青山村井边229号(城厢区太湖工业园区)；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。