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龙图腾网获悉广州润生细胞医药科技有限责任公司申请的专利一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN121046465B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511591999.6，技术领域涉及：C12N15/87；该发明授权一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法是由阮润生;赖丽嫦;张博越;梁国正设计研发完成，并于2025-11-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法在说明书摘要公布了：本发明属于细胞电转化技术领域，具体涉及一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法。包括如下步骤：S1、iDC预处理；S2、iDC电转染；S3、iDC诱导mDC。本发明提供的一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法显著提升了电转染效率，显著提高了电转后细胞存活率。并且操作简单，易于在现有实验体系中推广。最终获得的DC细胞状态更好，功能更佳，为下游免疫治疗应用奠定坚实基础。

本发明授权一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法在权利要求书中公布了：1.一种提高树突状细胞电转染效率及存活率的方法，其特征在于，包括如下步骤： S1、iDC预处理： 将收集的iDC重悬到新鲜的完全培养液，细胞密度调整为1×106mL，置于细胞培养箱中培养2h； S2、iDC电转染： S201、将收集并预处理后的iDC，用Opti培养基洗涤2次，在室温下400g离心5min； S202、将iDC用100μL预冷的DC‑EB电转液重悬，使得到的细胞悬液与mRNA混匀； 所述的DC‑EB电转液的配方为配方2、配方3或配方4； 配方2的组成为：碘克沙醇19%、K2HPO4 10mM、HEPES 25mM、KCl 3.6mM、无水MgCl2 5.4mM、CaCl2·2H2O 0.88mM、琥珀酸钠10mM、甘露醇25mM、蔗糖95.8mM、EDTA 0.2mM，pH 7.2，渗透压力294mOsmL； 配方3的组成为：碘克沙醇19%、K2HPO4 10mM、HEPES 25mM、KCl 3.6mM、无水MgCl2 5.4mM、CaCl2·2H2O 0.88mM、琥珀酸钠10mM、甘露醇25mM、蔗糖95.8mM、GlutaMAXTM 2%、EDTA 0.2mM，pH 7.2，渗透压力310mOsmL； 配方4的组成为：碘克沙醇19%、K2HPO4 10mM、HEPES 25mM、KCl 3.6mM、无水MgCl2 5.4mM、CaCl2·2H2O 0.88mM、琥珀酸钠10mM、甘露醇25mM、蔗糖75mM、GlutaMAXTM 3%、EDTA 0.2mM，pH 7.2，渗透压力308mOsmL； 所述mRNA编码串联的4条肿瘤新抗原多肽，所述4条肿瘤新抗原多肽的氨基酸序列依次如SEQ ID NO.1、2、3、4所示，溶解置无RNA酶的水中配制成母液，母液浓度为1μgμL，充分混匀后，分装避光保存于‑80℃； S203、应用电转系统进行瞬间稳定电转染，瞬间稳定电转染后，立即向电转杯加入37℃预热的含10μM Y‑27632的细胞培养液400μL，放置37℃细胞培养箱中静置10‑15min； 所述的瞬间稳定电转染时控制脉冲电压150‑300v、脉冲时程5‑50ms、脉冲次数1‑3次； S204、随后，将电转后的细胞种于提前预热的细胞板中，细胞培养密度为1×106cellsmL，培养条件为37℃、5% CO2的二氧化碳培养箱培养，得到负载表达抗原的mRNA的iDC细胞； S3、iDC诱导mDC： 负载表达抗原的mRNA的iDC在细胞培养箱中稳定培养4‑6h后，加入成熟诱导剂IFNγ和LPS，诱导成熟过夜，得到负载表达抗原的mRNA的mDC细胞。

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