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龙图腾网获悉西南林业大学申请的专利一种根癌农杆菌介导的无籽基因转化诺丽的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN108004269B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-02-27发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：201810005684.2，技术领域涉及：C12N15/84；该发明授权一种根癌农杆菌介导的无籽基因转化诺丽的方法是由吴田;蓝增全设计研发完成，并于2018-01-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种根癌农杆菌介导的无籽基因转化诺丽的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及一种根癌农杆菌介导的无籽基因转化诺丽的方法。其技术方案是：包括以下步骤：以继代30d的诺丽无菌试管苗根段为外植体，采用根癌农杆菌介导法将无籽基因导入诺丽根段中：诺丽无菌苗根段在3%MS液体培养基中震荡预培养3d，经根癌农杆菌菌液，侵染20min，在共培养基上暗培养3d后，置于抗性筛选培养基上培养20d，进行筛选培养，统计外植体抗性芽分化率；有益效果是：本发明以诺丽无菌苗根段为外植体，采用农杆菌介导法将无籽基因导入诺丽根段中，实现诺丽无籽化，以希后续使用诺丽榨汁时减少工业废渣，同时也为其他外源基因转化诺丽提供可借鉴的技术方法以及为后续诺丽功能基因的鉴定奠定基础。

本发明授权一种根癌农杆菌介导的无籽基因转化诺丽的方法在权利要求书中公布了：1.一种根癌农杆菌介导的无籽基因转化诺丽的方法，其特征是：包括以下步骤： 以继代30d的诺丽无菌试管苗根段为外植体，采用根癌农杆菌介导法将无籽基因导入诺丽根段中：诺丽无菌苗根段在3%MS液体培养基中震荡预培养3d，经根癌农杆菌菌液，侵染20min，在共培养基上暗培养3d后，置于抗性筛选培养基上培养20d，进行筛选培养，统计外植体抗性芽分化率； 根癌农杆菌菌液，经过培养8-9h，OD600≈0.5； 共培养基的配比是：3%MS固体培养基+100μmolLAS，抗性筛选培养基采用3%MS固体培养基+1.5mgL6-BA+15mgLKan+200mgLCef； 继代30d的诺丽无菌试管苗根段采用的组培苗每30d继代一次，继代培养基为3%MS固体培养基+0.2mgLNAA； 所述3%MS固体培养基是在3%MS液体培养基的基础上，加入6.5gL琼脂粉，于高压灭菌锅121℃灭菌20min； 所述根癌农杆菌的培养包括以下步骤： 用无菌接种环蘸取根癌农杆菌菌液，在YEB固体培养基上划线后于28℃培养箱倒置暗培养至长出单菌落；挑取单菌落接种于YEB液体培养基中，28℃、200rmin摇床培养至混浊，然后取1mL菌液加入含有100µmolLAS的50mlYEB液体培养基中进行亚培养，每小时用紫外分光光度计测量农杆菌菌液的OD值，绘制农杆菌生长曲线； 所述的YEB固体培养基：是在YEB液体培养基的基础上，加入6.5gL琼脂粉，于高压灭菌锅121℃灭菌20min； 所述的YEB液体培养基：含50mgLRif+50mgLKan+100µmolLAS。

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