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龙图腾网获悉海南大学;海南大学三亚研究院申请的专利一种Argonaute介导链置换指数扩增方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116254327B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310236698.6，技术领域涉及：C12Q1/6844；该发明授权一种Argonaute介导链置换指数扩增方法及应用是由周非凡;黄茹;张凡;吴玲轶设计研发完成，并于2023-03-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种Argonaute介导链置换指数扩增方法及应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种Argonaute介导链置换指数扩增方法及应用，首先在gDNA引导下TtAgo酶特异性识别并剪切，剪切位点位于gDNA与目标基因或DNA片段形成的互补片段内，通过一对扩增引物在聚合酶的作用下延伸形成双链，该双链存在剪切位点可继续被蛋白识别剪切，而被置换下的单链可作为循环二的底物；在循环一延伸过程中被置换下的序列可与扩增引物互补结合并在聚合酶的作用下延伸，延伸出的产物同样具有剪切位点，在TtAgo酶剪切作用下形成单链可继续作为循环二的底物参与循环，本发明在实现高效扩增的同时，显著缩短了扩增反应所需的时间，在扩增过程中逐步自检，实现了DNA上单碱基差异的显著区分。

本发明授权一种Argonaute介导链置换指数扩增方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种用于非疾病诊断目的的Argonaute介导链置换指数扩增方法，其特征在于：包括如下步骤： 步骤一、以需要检测的目标基因或DNA片段为靶序列设计两条gDNA，所用的两条gDNA的5’端T碱基被磷酸基团修饰，gDNA1和靶序列正向链5’端形成互补，gDNA2和靶序列反向链5’端形成互补； 步骤二、gDNA1引导TtAgo酶与靶序列正向链5’端结合并剪切，gDNA2引导TtAgo酶与靶序列反向链5’端结合，剪切位点位于gDNA与靶序列形成的互补片段内； 步骤三、设计链置换扩增引物，包括与靶序列反向链结合的扩增引物P1和与靶序列正向链链置换结合的扩增引物P2，所述扩增引物P1或和P2带有单碱基突变位点，扩增引物P1在聚合酶的作用下以步骤二中剪切得到的反向链为模板延伸形成双链A，扩增引物P2在聚合酶的作用下以步骤二中剪切得到的正向链为模板延伸形成双链B； 步骤四、循环一： gDNA1引导TtAgo酶与步骤三中双链A正向链5’端结合并剪切，扩增引物P1在聚合酶的作用下以步骤三中的双链A反向链为模板延伸形成双链A； gDNA2引导TtAgo酶与步骤三中的双链B反向链5’端结合并剪切，扩增引物P2在聚合酶的作用下以步骤三中的双链B反向链为模板延伸形成双链B； 步骤五、循环二： 扩增引物P1在聚合酶的作用下以步骤四中双链B被剪切后的反向链为模板延伸，然后经gDNA1引导TtAgo酶剪切后得到双链C，双链C的单链作为底物继续参与循环二； 扩增引物P2在聚合酶的作用下以步骤四中双链A被剪切后的正向链为模板延伸，然后经gDNA2引导TtAgo酶剪切得到双链C，双链C的单链作为底物继续参与循环二。

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