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龙图腾网获悉中国人民解放军陆军特色医学中心申请的专利基于点亮型点击连接探针快速检测基因变异的试剂盒及检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115341017B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211159546.2，技术领域涉及：C12Q1/6858；该发明授权基于点亮型点击连接探针快速检测基因变异的试剂盒及检测方法是由黄庆;吕静;任晓东;苏宁;鲁卫平;邓少丽设计研发完成，并于2022-09-22向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于点亮型点击连接探针快速检测基因变异的试剂盒及检测方法在说明书摘要公布了：本发明属于基因检测技术领域，具体涉及基于点击化学及点亮型点击连接探针快速检测基因变异的试剂盒及检测方法，试剂盒中的点亮型点击连接探针是由与待检测靶序列互补的头尾衔接的两条寡核苷酸片段组成，分别是与靶序列互补的5'‑端寡核苷酸片段和3'‑端寡核苷酸片段，并且，5'‑端寡核苷酸片段的3'‑末端和3'‑端寡核苷酸片段的5'‑末端均标记了点击化学官能基团。当存在待识别的靶序列，在核酸扩增过程中，靶序列会触发点击化学反应，与靶序列互补的点亮型点击连接探针释放荧光信号，实现待检靶基因野生型和突变型基因在单个反应管或单个检测点的实时平行同步检测。本发明适用于多种核酸扩增技术，并具备单碱基变异精确识别能力。

本发明授权基于点亮型点击连接探针快速检测基因变异的试剂盒及检测方法在权利要求书中公布了：1.一种基于点击化学连接快速检测基因变异的方法，所述方法不以诊断为目的，其特征在于：采用基于点亮型点击连接探针快速检测基因变异的试剂盒进行，所述的方法是边扩增边连接，采用重组酶聚合酶扩增，所述试剂盒包括以下反应成分： ①上游引物和下游引物； ②一组点亮型点击连接探针：识别待检基因的野生型和突变型序列； ③待检核酸模板； ④三磷酸脱氧核苷酸dNTPs，包括dATP、dTTP、dCTP、dGTP； ⑤其他完成核酸扩增所需的酶、辅因子、离子与缓冲体系； 所述反应成分的反应混合物在恒温条件下进行反应； 所述点亮型点击连接探针是由与待检测靶序列互补的头尾衔接的两条寡核苷酸片段组成，分别是与靶序列互补的5'-端寡核苷酸片段和3'-端寡核苷酸片段； 对于所述点亮型点击连接探针，基因变异碱基的识别位点位于点亮型点击连接探针的5'-端寡核苷酸片段的3'端或5'端或中间任意一个位置；或者，变异碱基的识别位点位于点亮型点击连接探针的3'-端寡核苷酸片段的5'端或3'端或中间任意一个位置； 或者，点亮型点击连接探针的序列中，特异性识别待检靶基因变异序列的碱基被同时设计在点亮型点击连接探针的5'-端寡核苷酸片段和3'-端寡核苷酸片段； 点亮型点击连接探针的5'-端寡核苷酸片段的3'-末端标记点击化学官能团A和荧光报告基团，并且，点击化学官能团A对该片段标记的荧光报告基团有荧光淬灭效应，此外，点亮型点击连接探针的3'-端寡核苷酸片段的5'-末端标记点击化学官能团B，3'-末端碱基的3'-OH标记阻断基团；或者，点亮型点击连接探针的5'-端寡核苷酸片段的3'-末端标记点击化学官能团B，此外，点亮型点击连接探针的3'-端寡核苷酸片段的5'-末端标记点击化学官能团A和荧光报告基团，并且，该点击化学官能团A对该片段标记的荧光报告基团有荧光淬灭效应，3'-末端碱基的3'-OH标记阻断基团； 点击化学官能团A是四嗪基团，点击化学官能团B是环状烯烃基团或环状炔烃基团； 所述点击化学官能团A与荧光报告基团直接以线性方式串联连接在一起；所述点亮型点击连接探针的点击化学官能团A和点击化学官能团B是具有相互发生非常快速高效点击连接反应的一对点击化学官能团，并且，点击化学官能团A对其所在寡核苷酸片段标记的荧光报告基团具有荧光淬灭作用。

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