华东理工大学蔡孟浩获国家专利权
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龙图腾网获悉华东理工大学申请的专利一种发酵生产胞磷胆碱的基因工程菌及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115896211B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110949063.1,技术领域涉及:C12P19/30;该发明授权一种发酵生产胞磷胆碱的基因工程菌及应用是由蔡孟浩;任燕娜;张元兴设计研发完成,并于2021-08-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种发酵生产胞磷胆碱的基因工程菌及应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种发酵生产胞磷胆碱的基因工程菌及应用。本发明揭示了一种优化的生产胞磷胆碱的基因工程菌、其构建方法以及利用其进行生产的方法。本发明中,通过基因重组技术在酵母工程菌中过表达Cct、Cki、Hnm1、sATP6蛋白,更优选地还下调His4蛋白、Ku70蛋白、Shble蛋白、5’‑NT蛋白和或Cda蛋白的表达或活性,获得可生产胞磷胆碱的酵母工程菌。本发明的酵母工程菌具有代谢背景低、异源表达能力强,可利用磷酸胆碱和CMP为底物,高水平发酵生产胞磷胆碱且底物转化率较高等特征,为工业化生产胞磷胆碱提供了新思路。本发明也优化了利用所述工程菌的发酵生产体系,提供了高产胞磷胆碱的发酵方法。
本发明授权一种发酵生产胞磷胆碱的基因工程菌及应用在权利要求书中公布了:1.一种生产胞磷胆碱的方法,其特征在于,所述方法包括: 1提供酵母工程菌,所述酵母工程菌中转化有下组蛋白的表达盒:Cct蛋白,Cki蛋白,Hnm1蛋白和sATP6蛋白;且下调了选自a-c任一组的蛋白:aHis4、ku70和shble,bhis4、ku70、shble和5’-NT,chis4、ku70、shble和Cda;所述的酵母工程菌是毕赤酵母;所述的Cct蛋白来源于毕赤酵母,所述的Cki蛋白和Hnm1蛋白来源于酿酒酵母BY4742,所述的sATP6蛋白来源于拟南芥; 其中,所述的Cct蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示或其简并序列;所述的Cki蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的Hnm1蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的sATP6蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的His4蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的ku70蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的shble蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的5’-NT蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:8所示的核苷酸序列或其简并序列;所述的Cda蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO:9所示的核苷酸序列或其简并序列; 2培养1的酵母工程菌,从而以磷酸胆碱和CMP作为底物生成胞磷胆碱产物,CMP浓度为10~25gL;磷酸胆碱浓度为6~20gL。
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