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龙图腾网获悉宁波大学申请的专利基于HCR介导的多价适配体和CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116735867B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310426511.9，技术领域涉及：G01N33/569；该发明授权基于HCR介导的多价适配体和CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法是由乔朝晖;孙梦妮;时含星;马娜;杨文鸽设计研发完成，并于2023-04-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于HCR介导的多价适配体和CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了基于HCR介导的多价适配体和CRISPR‑Cas12a系统检测沙门氏菌的方法，特点是包括以下步骤：1将链酶亲和素纳米磁珠与生物素化适配体混合，得到适配体磁珠；2将触发链、发夹DNAH1、发夹DNAH2混合反应得到HCR支架，随后加入适配体得到基于HCR的多价适配体结构，其检测方法是通过适配体磁珠对沙门氏菌进行分离富集，并加入基于HCR的多价适配体得到磁珠‑沙门氏菌‑HCR三明治结构，随后加入CRISPR‑Cas12a体系，在37℃下反应1小时后得到增强的荧光信号，实现对待测溶液中沙门氏菌的检测，优点是灵敏度高、特异性强且准确性好。

本发明授权基于HCR介导的多价适配体和CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于HCR介导的多价适配体和CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法，本方法不以诊断或治疗为目的，其特征在于包括以下步骤： 1适配体磁珠的合成 将100μL1mgmL链酶亲和素化纳米磁珠溶液和100μL1μM生物素化适配体1溶液混合，于室温反应45分钟后，加入200μL4μMD-生物素，于室温反应30分钟以对纳米磁珠进行封闭，用含0.01wt%吐温-20的磷酸盐缓冲液磁分离洗涤两次，复溶于100μL磷酸盐缓冲液中，得到适配体磁珠溶液，于4℃保存备用，其中所述的生物素化适配体1的核苷酸序列如下：biotin-TTTTTTTTTTTTTTTCTCCTCTGACTGTAACCACGGTGGTTTGATCACTATTGGGCCTTTGTGATGTCGGTAGT； 2基于HCR的多价适配体的合成 将发夹DNAH1、发夹DNAH2和适配体2分别经退火前处理后，将发夹DNAH1、发夹DNAH2和触发链DNA混合反应，得到HCR骨架溶液，然后在HCR骨架溶液中加入经退火处理的适配体2，得到基于HCR的多价适配体溶液，其中所述的触发链DNA的核苷酸序列如下：GTATGTTGTTGCGGAATGGTCTAGGTGATTGAGTGG；所述的发夹DNAH1的核苷酸序列如下：TTTCCCTTATATTCTCTCTCTCTCCTGCGGGTTTGACTAGGTGATTGAGTGGTGTGTTATCCCACTCAATCACCTAGACCATTCCGCAACAACATAC；所述的发夹DNAH2的核苷酸序列如下：GATAACACACCACTCAATCACCTAGTCAAACCCGCAGTATGTTGTTGCGGAATGGTCTAGGTGATTGAGTGG；所述的适配体2的核苷酸序列如下：GAGAGAGAATATAAGGGAAAAAAAACTCCTCTGACTGTAACCACGGTGGTTTGATCACTATTGGGCCTTTGTGATGTCGGTAGT； 3沙门氏菌的检测 将步骤1中制备得到的适配体磁珠溶液与200μL不同浓度沙门氏菌菌液进行混合，于室温反应45分钟并经三次洗涤后，加入20μL0.5μM步骤2中制备得到的基于HCR的多价适配体，于室温反应45分钟并经三次洗涤后，复溶于5μLPBS溶液得到磁珠-沙门氏菌-HCR的三明治结构，再加入CRISPR-Cas12a体系，最后将反应体系于37℃反应1小时后，于蓝光下观察荧光强度并用酶标仪测定相对荧光强度，根据检测不同浓度沙门氏菌对应的吸光度值得到的曲线，对待测溶液中沙门氏菌浓度进行定量检测，其中所述的CRISPR-Cas12a体系为：2.5μL2μMCas12a酶、2.5μL2μMcrRNA、2μL2μM单链DNA荧光报告探针、2μL10URNA酶抑制剂，最后用无酶水定容至20μL，所述的单链DNA荧光报告探针核苷酸序列如下：FAM-TTATT-BHQ；所述的crRNA的核苷酸序列如下：GAAUUUCUACUGUUGUAGAACUAGGUGAUUGAGUGGUGUGUU。

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