浙江大学陆柏益获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利一种评估脂质吸收的再酯化测定方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118243845B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410285820.3,技术领域涉及:G01N30/90;该发明授权一种评估脂质吸收的再酯化测定方法及应用是由陆柏益;赵添;王章铁设计研发完成,并于2024-03-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种评估脂质吸收的再酯化测定方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种评估脂质吸收的再酯化测定方法,属于生物化学技术领域。本发明基于放射性同位素标记辅助液体闪烁计数技术提供了一种功能脂质再酯化评价方法,针对脂肪酸在辅酶a作用下反应生成酯酰辅酶a,利用放射性同位素标记辅酶a,通过计算产物中同位素回收率量化脂肪酸的再酯化率;针对甾醇与酯酰辅酶a反应生成甾醇脂肪酸酯,利用两种不同的同位素分别标记甾醇和酯酰辅酶a,通过检测产物中同时携带的两种同位素的强度表征反应物中酯酰辅酶a的减少量和产物中甾醇脂肪酸酯的生成量,量化甾醇的再酯化率。本发明以标记的辅酶a作为衡量代谢过程的评价物,将脂质代谢途径精确定位到辅酶a参与的酯化反应,排除未知代谢途径的影响。
本发明授权一种评估脂质吸收的再酯化测定方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种评估脂质吸收的再酯化测定方法,其特征在于,所述脂质为甾醇,所述方法包括以下步骤: 1待测甾醇上标记放射性同位素3H,再加入到单层培养的肠上皮细胞中孵育;然后加入含放射性同位素14C标记的酯酰辅酶a,孵育使得甾醇与酯酰辅酶a在细胞内发生再酯化反应生成同时具有14C和3H标记的甾醇脂肪酸酯; 2反应终止后,取细胞培养液离心,收集有机层,除去溶剂得到代谢产物; 3利用薄层色谱技术对代谢产物进行层析,切下甾醇脂肪酸酯对应的条带,转移到含有闪烁液的闪烁瓶中,搅拌孵育,液体闪烁计数仪检测同位素3H和14C强度,按照公式Ⅰ计算得待测甾醇再酯化率; Ⅰ, 其中给药剂量[14C]酯酰辅酶a为反应物中14C添加量,给药剂量[3H]甾醇为反应物中3H添加量,单层模型[14C]辅酶a为生成物中14C含量,单层模型[3H]甾醇脂肪酸酯为生成物中3H含量。
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