北京化工大学梁浩获国家专利权
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龙图腾网获悉北京化工大学申请的专利一种具有双酶活性的糖苷水解酶及其重组菌在制备稀有人参皂苷中的应用及方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118773170B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-06发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411108069.6,技术领域涉及:C12N9/24;该发明授权一种具有双酶活性的糖苷水解酶及其重组菌在制备稀有人参皂苷中的应用及方法是由梁浩;王子辰;郑安妮;魏斌;眭缘儿设计研发完成,并于2024-08-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种具有双酶活性的糖苷水解酶及其重组菌在制备稀有人参皂苷中的应用及方法在说明书摘要公布了:本发明涉及催化技术领域。本发明提供了一种具有双酶活性的糖苷水解酶及其重组菌在制备稀有人参皂苷中的应用及方法,所述糖苷水解酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。使用本发明中的糖苷水解酶或者表达该酶的重组菌可催化人参皂苷R1生产稀有人参皂苷Rh1,以及催化人参皂苷Rb1生产稀有人参皂苷C‑K。本发明所述糖苷水解酶同时具有木糖苷酶和葡萄糖苷酶活性,因此使用该酶或重组菌可以同时断裂人参皂苷R1苷元上C‑6位的木糖苷键和葡萄糖苷键生成稀有人参皂苷Rh1,对比单一酶活性的糖苷水解酶制备稀有人参皂苷的方法,具有工艺简单经济节约的优点,非常适合于大规模工业化生产。
本发明授权一种具有双酶活性的糖苷水解酶及其重组菌在制备稀有人参皂苷中的应用及方法在权利要求书中公布了:1.一种利用重组菌制备稀有人参皂苷的方法,其特征在于,包括如下步骤:在人参皂苷溶液中加入所述重组菌,催化后加入甲醇终止反应,得到稀有人参皂苷; 所述人参皂苷溶液的溶剂为Tris缓冲液,所述人参皂苷溶液中人参皂苷的浓度为0.2~2mgmL,所述重组菌的终浓度为OD600=1~4,所述催化的条件为30~50℃、pH5.5~8,所述催化的时间为12~36h,所述甲醇和人参皂苷溶液的体积比为1:0.8~1.2; 所用的人参皂苷溶液中的人参皂苷为人参皂苷R1,得到的稀有人参皂苷为人参皂苷Rh1; 所述重组菌通过如下步骤构建: 1将SEQIDNO.2所示的核苷酸序列进行PCR扩增后,采用同源重组的方法将其导入质粒中,得到重组质粒; 2通过化学转化法将重组质粒导入大肠杆菌BL21DE3中,获得重组菌; 所述质粒的种类为pETduet1或pET28a。
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