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龙图腾网获悉华南师范大学申请的专利基于荧光探针双通道亮度编码的快速多色成像方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116642864B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-17发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310369952.X，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权基于荧光探针双通道亮度编码的快速多色成像方法是由胡敏;胡淏岚;陈同生设计研发完成，并于2023-04-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于荧光探针双通道亮度编码的快速多色成像方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于荧光探针双通道亮度编码的快速多色成像方法，方法基于双通道多色荧光显微成像系统，方法包括：S1、确定双通道多色荧光显微成像系统特性和各光学元件的光谱特性；S2、分析系统器件，分别将系统分为激发光路和发射光路，并对光路中的器件进行编码；S3、根据各激发波长下不同的荧光探针在系统中的实际亮度进行编码；S4、筛选系统支持的荧光探针；S5、判断荧光探针是否满足二色同时成像和分时成像；S6、根据亮度编码，匹配荧光探针组合实现多色成像。本发明通过理论计算各激发波长下荧光探针亮度在双通道中是否可以成像并进行编码，评估了单波长激发双通道同时探测的可行性，快速匹配荧光探针组合，实现荧光多色成像。

本发明授权基于荧光探针双通道亮度编码的快速多色成像方法在权利要求书中公布了：1.基于荧光探针双通道亮度编码的快速多色成像方法，其特征在于，方法基于双通道多色荧光显微成像系统，方法包括以下步骤： S1、确定双通道多色荧光显微成像系统特性以及各光学元件的光谱特性； S2、分析系统器件，分别将系统分为激发光路和发射光路，并对激发光路和发射光路中的器件进行编码； S3、根据各激发波长下不同的荧光探针在双通道多色荧光显微成像系统中的实际亮度进行编码；根据探针Pi在激发光照射下得到各个通道的亮度，对其编码，编码由激发光源字段、激发光路和发射光路器件字段、亮度编码字段以及实际亮度值字段组成；其中，激发光源字段Lk用1个字节编码，能够表示256个激发波长；亮度编码字段BC由透射通道标记位T和反射通道标记位R组成，两个标记位分别用1个比特编码；实际亮度字段由透射通道实际亮度值和反射通道实际亮度值的二进制值进行编码，分别预留20个bit，最多能够表示100万的亮度值； 亮度编码字段BC的编码最终分为4种： 00，即两个通道均无法探测到荧光； 01，即透射通道无法探测到荧光，反射通道能够探测到荧光； 10，即透射通道能够探测到荧光，反射通道无法探测到荧光； 11，即两个通道均能够探测到荧光； S4、筛选支持双通道多色荧光显微成像系统的荧光探针； S5、判断荧光探针是否满足二色同时成像和分时成像； S6、根据亮度编码，匹配荧光探针组合实现多色成像； 在双通道多色荧光显微成像系统中，由于单次激发时最多只能实现二色成像，因此对于m色成像，m≥2，需要d次同时激发和s＝m-2d次分时激发，总激发次数为m-d，d次同时激发要求相互独立，即每组同时激发之间互相不发生串扰；其中，表示对m2向下取整； 步骤S6具体包括： S61、根据二色同时成像的亮度匹配条件，匹配出荧光探针组{m,n}N，N为符合条件的荧光探针组个数；具体为： 由于d次同时激发要求相互独立的，即d个探针组之间不存在激发串扰，不存在激发串扰即激发光能且仅能激发一个探针组，d个探针组的激发光互不相同，因此从探针编码匹配出的d次二色同时激发的探针组编码应满足： d个探针组的激发光源字段均不相同，即异或运算后结果为11111111；对于d个探针组中的任意一组{m,n}，在其所对应的激发光源字段编码下，其余d-1个探针组所包含的共2d-2个探针的亮度编码字段BC均为00； S62、当d次同时激发不能满足成像要求时，再次根据亮度编码匹配出s次分时激发的探针，具体为： 由于s次分时激发也是相互独立的，并且与前d次同时激发也相互独立，即d个同时激发的探针组和s个分时激发的探针之间均不存在激发串扰，总共d+s次激发的激发光均不相同，因此，从探针编码匹配出的s次分时激发的探针编码应满足： s个探针的激发光源字段编码均不相同，且与前d个探针组的激发光源字段编码也不同，即异或运算后结果为11111111；对于s个探针中的任意一个探针，在其所对应的激发光源字段编码下，其余s-1个探针以及前d个探针组所包含的2d个探针的亮度编码字段BC均为00。

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