江苏三联生物工程股份有限公司王莉贞获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏三联生物工程股份有限公司申请的专利重组神经元特异性烯醇化酶及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115786317B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-20发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211590329.9,技术领域涉及:C12N9/88;该发明授权重组神经元特异性烯醇化酶及其制备方法与应用是由王莉贞;李文波;陈博阳;丁俊杰;施启尧设计研发完成,并于2022-12-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本重组神经元特异性烯醇化酶及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本申请涉及一种重组神经元特异性烯醇化酶及其制备方法与应用,该制备方法包括对发酵液进行纯化的步骤,发酵液含有大肠杆菌,大肠杆菌已被诱导表达重组神经元特异性烯醇化酶,纯化的步骤包括:将发酵液固液分离,获得菌体;将菌体裂解后离心,得到含有重组神经元特异性烯醇化酶的粗上清液;将粗上清液经镍离子亲和层析纯化,得到粗蛋白液;将粗蛋白液经复合阳离子交换层析纯化,得到精蛋白液,其中,复合阳离子交换层析的平衡液为pH5.3~6.8或2.8~4.2,复合阳离子交换层析的线性流速为100cmh~300cmh,及将精蛋白液经凝胶层析纯化,得到纯化后的重组神经元特异性烯醇化酶。
本发明授权重组神经元特异性烯醇化酶及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种重组神经元特异性烯醇化酶的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括对发酵液进行纯化的步骤,所述发酵液含有大肠杆菌,所述大肠杆菌已被诱导表达重组神经元特异性烯醇化酶,所述重组神经元特异性烯醇化酶的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示,所述纯化的步骤包括: 将所述发酵液固液分离,获得菌体; 将所述菌体裂解后离心,得到含有重组神经元特异性烯醇化酶的粗上清液; 将所述粗上清液经镍离子亲和层析纯化,得到粗蛋白液; 将所述粗蛋白液经复合阳离子交换层析纯化,得到精蛋白液,其中,所述复合阳离子交换层析的平衡液的pH为5.3~6.8,所述复合阳离子交换层析的线性流速为100cmh~300cmh,收集流穿液,获得精蛋白液,及将所述精蛋白液经凝胶层析纯化,得到纯化后的重组神经元特异性烯醇化酶;所述离子层析柱的填料为复合阳离子交换介质MMC。
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