扬州大学;江苏省家禽科学研究所靳锴获国家专利权
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龙图腾网获悉扬州大学;江苏省家禽科学研究所申请的专利一种快速鉴定外源cop-GFP的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116179670B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-20发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310096548.X,技术领域涉及:C12Q1/6876;该发明授权一种快速鉴定外源cop-GFP的方法是由靳锴;高嘉晨;左其生;韩威;陈国宏;李碧春设计研发完成,并于2023-02-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种快速鉴定外源cop-GFP的方法在说明书摘要公布了:本发明属于基因检测技术领域,本发明提供了一种快速鉴定外源cop‑GFP的方法。本发明根据cop‑GFP的DNA序列设计合成地高辛探针,使用离心柱纯化法提取待测样本的DNA,将所述待测样本的DNA进行煮沸处理后加到薄膜上,将膜DNA面与预杂交液混合进行预杂交,再取出与含地高辛探针的杂交液混合进行杂交过夜,漂洗得探针交联膜,最后使用核酸检测试剂盒对所述探针交联膜进行显影实验,判定结果。本发明可以较快地检测到cop‑GFP绿色荧光在细胞内的表达。且本发明可以一次检测多个样品,并且后续可以通过斑点印迹分析cop‑GFP在细胞内的表达量。
本发明授权一种快速鉴定外源cop-GFP的方法在权利要求书中公布了:1.一种快速鉴定外源cop-GFP的方法,其特征在于,包括如下步骤: 1根据cop-GFP的DNA序列设计合成地高辛探针;所述cop-GFP的DNA序列如SEQIDNO.1所示;所述地高辛探针的DNA序列如SEQIDNO.2所示; 2使用离心柱纯化法提取待测样本的DNA; 3将所述待测样本的DNA进行煮沸处理后加到薄膜上; 4待膜风干后置于2×SSC缓冲液中浸泡; 5浸泡结束后使用紫外交联将DNA固定在膜上; 6固定结束后将膜DNA面与预杂交液混合进行预杂交,得预杂交膜;所述预杂交液包括如下组分:25~35mL20×SSC缓冲液,8~12mL50×Denhardt’s,4~6mL10×SDS,0.5~1.5mLSalmonDNA和50~55mLdH2O,所述SalmonDNA的浓度为8~12mgmL,所述预杂交的温度为55~65℃; 7将步骤1所得地高辛探针进行煮沸变性后冷却,然后与杂交液混合,得混合液;所述杂交液包括如下组分:25~35mL20×SSC缓冲液,8~12mL50×Denhardt’s,4~6mL10×SDS和50~55mLdH2O; 8将步骤6所得预杂交膜与步骤7所得混合液混合进行杂交过夜,然后使用0.5×SSC溶液进行漂洗,得探针交联膜;所述杂交的温度为55~65℃; 9使用核酸检测试剂盒对所述探针交联膜进行显影实验。
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