中化健康产业发展有限公司;天津大学卢文玉获国家专利权
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龙图腾网获悉中化健康产业发展有限公司;天津大学申请的专利生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌及构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116200321B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-20发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310032995.9,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌及构建方法是由卢文玉;魏晓珍;张占维;张金宏;张传波;汪振洋设计研发完成,并于2023-01-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌及构建方法在说明书摘要公布了:本发明公开了生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌及构建方法,构建方法为:用EM核苷酸片段替换pETDuet‑1的表达模块得到质粒1;用EM核苷酸片段替换pRSFDuet‑1的表达模块得到质粒2;将优化后的香叶醇合酶基因ObGES整合到质粒1,并将优化后的香叶基焦磷酸合酶基因AgGPPS整合到质粒1,得到质粒3;将优化后的EcGeDH整合到质粒3,得到质粒4;将优化后的SsOYE2.6W78YC113I整合到质粒2,并将优化后的香茅醛环化酶基因ZmSHCF486C整合质粒2,得到质粒5;将质粒4、5导入大肠杆菌中,得到生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌;本发明的重组大肠杆菌发酵后可得到异胡薄荷醇。
本发明授权生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌及构建方法在权利要求书中公布了:1.生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌的构建方法,其特征是包括如下步骤: 1用EM核苷酸片段替换pETDuet-1的表达模块核苷酸片段得到质粒1; 用EM核苷酸片段替换pRSFDuet-1的表达模块核苷酸片段得到质粒2; 所述EM核苷酸片段的序列如SEQIDNo.1所示; 所述质粒1的核苷酸序列如SEQIDNo.39所示; 所述质粒2的核苷酸序列如SEQIDNo.40所示; 2将优化后的香叶醇合酶基因ObGES整合到质粒1的第一个启动子的RBS后,并将优化后的香叶基焦磷酸合酶基因AgGPPS整合到第二个启动子的RBS后,得到质粒3; 所述优化后的香叶醇合酶基因ObGES的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示; 所述优化后的香叶基焦磷酸合酶基因AgGPPS的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示; 所述质粒3的核苷酸序列如SEQIDNo.41所示; 3将优化后的香叶醇脱氢酶基因EcGeDH整合到质粒3的BamHI酶切位点后,得到质粒4; 所述优化后的香叶醇脱氢酶基因EcGeDH的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示; 所述质粒4的核苷酸序列如SEQIDNo.42所示; 4将优化后的香叶醛还原酶基因SsOYE2.6W78YC113I整合到质粒2的第一个启动子的RBS后,并将优化后的香茅醛环化酶基因ZmSHCF486C整合到第二个启动子的RBS后,得到质粒5; 所述优化后的香叶醛还原酶基因SsOYE2.6W78YC113I的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示; 所述优化后的香茅醛环化酶基因ZmSHCF486C的核苷酸序列如SEQIDNo.6所示; 所述质粒5的核苷酸序列如SEQIDNo.43所示; 5将质粒4和质粒5导入大肠杆菌DH5α中,得到生产异胡薄荷醇的重组大肠杆菌6。
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