海南大学汪瑞敏获国家专利权
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龙图腾网获悉海南大学申请的专利仙人掌果纯化提取物中降尿酸降糖活性成分的筛选及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117783405B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-20发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311700274.7,技术领域涉及:G01N30/88;该发明授权仙人掌果纯化提取物中降尿酸降糖活性成分的筛选及应用是由汪瑞敏;王慧娴;吴金涛;方雅静;周晓璐;张家超设计研发完成,并于2023-12-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本仙人掌果纯化提取物中降尿酸降糖活性成分的筛选及应用在说明书摘要公布了:本发明提供了仙人掌果纯化提取物中降尿酸降糖活性成分的筛选及应用,筛选方法包括:将仙人掌果纯化提取物与XODα‑Glu孵育后,生物亲和超滤将配体‑XODα‑Glu抑制剂复合物与未结合的复合物分离,随后通过UPLC‑QTRAP‑MSMS方法分析识别和量化配体‑XODα‑Glu抑制剂复合物释放的配体化合物。本发明通过生物亲和超滤联合UPLC‑QTRAP‑MSMS技术首次从仙人掌果纯化提取物中筛选鉴定出XOD和α‑Glu抑制剂,并根据分子对接阐述抑制剂与酶的结合位点和相关作用机制,为制备降尿酸降糖的天然药物提供了理论和技术支持,具有极大的应用前景。
本发明授权仙人掌果纯化提取物中降尿酸降糖活性成分的筛选及应用在权利要求书中公布了:1.仙人掌果纯化提取物中降尿酸降糖活性成分的筛选方法,包括:将仙人掌果纯化提取物分别和XOD、α-Glu孵育后,生物亲和超滤分别将配体-XOD抑制剂复合物、配体-α-Glu抑制剂复合物与未结合的复合物分离,随后通过UPLC-QTRAP-MSMS方法分析识别和量化配体-XOD抑制剂复合物和配体-α-Glu抑制剂复合物释放的配体化合物; 所述仙人掌果纯化提取物通过以下方法制得:将新鲜采摘仙人掌果去籽后经真空冷冻干燥后研成粉末,过60目筛,果粉与60%乙醇充分混合,超声辅助提取,然后离心收集上清液,残渣复提一次,并合并两次提取的上清液,上清液用旋转蒸发器浓缩后,经AB-8大孔吸附树脂填充层析柱纯化,并用蒸馏水清洗流出液至无色,然后用95%乙醇洗脱,浓缩经乙醇洗脱的洗脱液,冷冻干燥后得到纯化多酚提取物; 将10mgmL仙人掌果纯化提取液分别与5UmL,pH7.4的XOD溶液和10UmL,pH6.8的α-Glu溶液按照体积比1:2在30kDa超滤管中37℃恒温孵育30分钟; 所述生物亲和超滤为:利用超滤管以12000×g离心10分钟进行超滤离心,分别用0.2M、0.1M磷酸盐缓冲液洗涤三次洗脱下未与XOD、α-Glu特异性结合的化合物,再利用90%甲醇解离,将超滤管中与酶结合的物质洗脱下来得到洗脱液; 所述UPLC-QTRAP-MSMS方法为:通过WatersAcquityUPLCHSST3,1.8μm,2.1×100mm液相色谱柱对目标化合物进行色谱分离,液相色谱A相为含0.1%甲酸水溶液,B相为乙腈流速为0.8mLmin,梯度洗脱,柱温设定为40℃,自动进样器温度设置为4℃,进样量为2μL;以多反应监测模式进行质谱分析,离子源参数如下:IonSprayVoltage:+5500-4500V,CurtainGas:35psi,Temperature:400℃,IonSourceGas1:60psi,IonSourceGas2:60psi,DP:+100V; 所述仙人掌果纯化提取物中共鉴定出16种化学成分,分别为绿原酸、没食子酸甲酯、龙胆酸、二氢杨梅素、异槲皮苷、芦丁、山柰苷、阿魏酸、山奈酚-3-O-芸香糖苷、二氢槲皮素、紫云英苷、咖啡酸甲酯、槲皮素、柚皮素、山奈酚、异鼠李素;筛选出七个XOD抑制剂成分:二氢杨梅素、山奈苷、没食子酸甲酯、异鼠李素、绿原酸、柚皮素、二氢槲皮素和八个α-Glu抑制剂成分:山奈苷、异鼠李素、紫云英苷、芦丁、异槲皮苷、柚皮素、绿原酸、二氢槲皮素。
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