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龙图腾网获悉江南大学申请的专利核酸多色荧光探针及制备与在实时原位观察P53介导的细胞凋亡通路顺序激活中的应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114854823B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210366028.1，技术领域涉及：C12Q1/6804；该发明授权核酸多色荧光探针及制备与在实时原位观察P53介导的细胞凋亡通路顺序激活中的应用是由马小媛;李晨彪;陈沛芳;王周平设计研发完成，并于2022-04-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本核酸多色荧光探针及制备与在实时原位观察P53介导的细胞凋亡通路顺序激活中的应用在说明书摘要公布了：本发明公开了核酸多色荧光探针及制备与在实时原位观察P53介导的细胞凋亡通路顺序激活中的应用。在S‑AuNSs@SiO2表面通过酰胺键修饰P53固定链、Bax固定链以及Cytc固定链，通过互补配对准则连接上修饰有不同荧光基团的互补链、适配体链，构建多色荧光探针。在靶标存在下，DNA双链被迫解开，荧光团从体系中释放出来使猝灭的荧光恢复。由于具有20个对称“热点”，可产生更强的局部电场，基于S‑AuNSs的探针表现出更好的光学性能。本发明的S‑AuNSs@SiO2‑P集成度高，易于获取，实现了活细胞中实时原位观察P53介导的凋亡通路的顺序激活，在机理研究、药物发现、凋亡过程动态监测等具有应用前景。

本发明授权核酸多色荧光探针及制备与在实时原位观察P53介导的细胞凋亡通路顺序激活中的应用在权利要求书中公布了：1.一种核酸多色荧光探针S-AuNSs@SiO2-P，其特征在于，包括由二氧化硅包覆的对称金纳米星、靶标固定链和靶标识别链； 其中，所述二氧化硅包覆的对称金纳米星的直径为260～300nm；所述靶标固定链为P53固定链、Bax固定链和Cytc固定链；所述靶标识别链为P53识别链、Bax识别链和Cytc适体链；所述靶标固定链和靶标识别链通过碱基互补配对进行连接； 所述P53固定链、Bax固定链或Cytc固定链标记有羧基基团，所述P53识别链、Bax识别链或Cytc适体链标记有不同的荧光基团，所述P53固定链序列为5’-COOH-AAAAAGCTTTGAGGTGC-3’，Bax固定链为5’-COOH-AAAAAAGAGGCGGGGG-3’，Cytc固定链为5’-COOH-AAAAAGCAACAACGTAC-3’，P53识别链为5’-GCACAAACACGCACCTCAAAGC-荧光基团-3’，Bax识别链为5’-CTCAGAGCTGGTGGGCCCCCCGCCTCT-荧光基团-3’，Cytc适体链为5’-CCGTGTCTGGGGCCGACCGGCGCATTGGGTACGTTGTTGC-荧光基团-3’； 核酸多色荧光探针S-AuNSs@SiO2-P的制备方法，包括以下步骤： 1将二氧化硅包覆的对称金纳米星进行氨基化，得到所述氨基官能化的二氧化硅包覆的对称金纳米星S-AuNSs@SiO2； 2取靶标固定链，并加入EDC和NHS并孵育，加入氨基官能化的二氧化硅包覆的对称金纳米星进行反应，得到cDNA修饰的S-AuNSs@SiO2； 3将靶标识别链与步骤2所得cDNA修饰的S-AuNSs@SiO2混合孵育，得到所述核酸多色荧光探针S-AuNSs@SiO2-P； 其中，所述靶标固定链与氨基官能化的二氧化硅包覆的对称金纳米星S-AuNSs@SiO2的摩尔比为600～1000：1～4，所述靶标识别链与cDNA修饰的S-AuNSs@SiO2的摩尔比为300～700：1～4； 所述二氧化硅包覆的对称金纳米星通过以下方法制备得到： S1：将PVP溶液加热至回流，加入HAuCl4·3H2O的DEG溶液并反应，反应结束，清洗并固液分离取固相，并将固相分散于有机溶剂中，得到I-AuNPs溶液； S2：向PVP溶液中加入DMA溶液和盐酸溶液搅拌混合均匀，加入S1中所得I-AuNPs溶液，然后加入HAuCl4溶液，加热反应得到对称金纳米星； S3：将CTAC加入S2中所得对称金纳米星的水溶液并搅拌，加入NaOH溶液，并将TEOS至少分三次加入，反应得到所述二氧化硅包覆的对称金纳米星。

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