四川大学李中瀚获国家专利权
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龙图腾网获悉四川大学申请的专利人多能干细胞来源的巩板成骨/软骨间质前体细胞、其制法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115612664B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211220041.2,技术领域涉及:C12N5/077;该发明授权人多能干细胞来源的巩板成骨/软骨间质前体细胞、其制法及应用是由李中瀚;熊靖飞设计研发完成,并于2022-10-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本人多能干细胞来源的巩板成骨/软骨间质前体细胞、其制法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了人多能干细胞来源的巩板成骨软骨间质前体细胞、其制法及应用,属于生物医药技术领域,解决现有技术中分化的重复性差、分化效率低下、分化时间长的问题。本发明的制备方法包括:步骤1.原条分化;步骤2.前体节中胚层分化;步骤3.传代及巩板间质前体细胞分化。本发明设计科学,构思巧妙,起始细胞密度控制简单、具体、易实现。本发明分化流程简单,时间短。本发明分化而成的细胞表达巩板成骨软骨间质前体细胞的相关分子标记,且具有体外软骨向及骨向分化能力。采用本发明方法分化效率高、重复性高。分化效率稳定控制99.2%0±0.7%。
本发明授权人多能干细胞来源的巩板成骨/软骨间质前体细胞、其制法及应用在权利要求书中公布了:1.一种人多能干细胞来源的巩板成骨软骨间质前体细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 步骤1.原条分化:将分化培养基I加入到人多能干细胞中,37±1℃培养24小时;所述分化培养基I为含有30ngmLactivinA、7μMCHIR99021、20ngmLbFGF的CDMi基础培养基; 步骤2.前体节中胚层分化:将经步骤1培养后的细胞吸去分化培养基I,涮洗细胞后,加入分化培养基II,37±1℃培养24小时;所述分化培养基II为含有20μMSB431542、125nMLDN193189、3μMCHIR99021、40ngmLbFGF的CDMi基础培养基; 步骤3.传代及巩板间质前体细胞分化:将经步骤2培养后的细胞吸去分化培养基II,再消化、中和、吹打细胞,制得单细胞混悬液,离心,重悬,将细胞重悬液接种于培养皿中,接种密度1×105~1.5×105细胞cm2;加入分化培养基Ⅲ,37±1℃培养24小时后,再将培养基更换为分化培养基Ⅳ,37±1℃诱导培养24小时; 所述分化培养基Ⅲ为含200nMSAG、600nMLDN193189、0.5μMXAV939、10μMROCKi的CDMi基础培养基; 所述分化培养基Ⅳ为含有200nMSAG、600nMLDN193189、0.5μMXAV939的CDMi基础培养基。
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