华南农业大学罗林获国家专利权
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龙图腾网获悉华南农业大学申请的专利一种基于原位生长的普鲁士蓝纳米酶检测苯佐卡因的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115656498B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211255363.0,技术领域涉及:G01N33/535;该发明授权一种基于原位生长的普鲁士蓝纳米酶检测苯佐卡因的方法是由罗林;李景敏;徐振林;王弘;贾宝珠;罗春艳;蒋少科设计研发完成,并于2022-10-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于原位生长的普鲁士蓝纳米酶检测苯佐卡因的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于原位生长的普鲁士蓝纳米酶检测苯佐卡因的方法,其包括以下步骤:S1.原位生长普鲁士蓝纳米酶;S2.制备纳米探针;S3.制备比色免疫传感器:基于步骤S2得到的纳米探针制备比色免疫传感器;S4.构建标准曲线;S5.测定样品中的苯佐卡因。本发明利用含有铁离子的聚多巴胺在酸性条件下加入亚铁氰化钾原位生长普鲁士蓝纳米酶,普鲁士蓝纳米酶可以通过催化H2O2产生‑OH,从而使显色底物四甲基联苯胺由无色变为蓝色。通过静电吸附法标记苯佐卡因抗体,利用抗原与抗体的特异性识别,加入目标物,通过目标物与抗原的竞争作用,进而构建一种间接竞争酶联免疫比色传感分析方法。该方法用于痕量检测苯佐卡因的检出限为0.042ngmL。
本发明授权一种基于原位生长的普鲁士蓝纳米酶检测苯佐卡因的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于原位生长的普鲁士蓝纳米酶检测苯佐卡因的方法,其特征在于,其包括以下步骤: S1.原位生长普鲁士蓝纳米酶:将多巴胺和氯化铁完全溶解在去离子水中,反应,得混合液;在上述混合液中加入Tris溶液,继续反应,离心,然后用超纯水洗涤,冷冻干燥后得到铁基聚多巴胺纳米球;将铁基聚多巴胺纳米球重新分散在离子水中,加入亚铁氰化钾水溶液和盐酸,反应,离心,用超纯水洗涤,冷冻干燥得到普鲁士蓝纳米酶; S2.制备纳米探针:根据步骤S1制备的原位生长普鲁士蓝纳米酶重新分散在超纯水中,加入苯佐卡因抗体,在室温下搅拌,再加入牛血清白蛋白进行封闭,离心去除上清液,最后用探针复溶液分散备用; S3.制备比色免疫传感器:基于步骤S2得到的纳米探针制备比色免疫传感器; S4.构建标准曲线:配置不同浓度的苯佐卡因标准品溶液,加入包被有苯佐卡因包被原的酶标板中,加入等体积的普鲁士蓝纳米探针,水浴反应完全后,加入显色液,显色完成后用酶标仪检测吸光值,得到吸光值与抗原浓度的标准曲线; S5.测定样品中的苯佐卡因:将等体积处理好的样品代替苯佐卡因标准品溶液,按照标准曲线的方法对样品进行测定,代入所述步骤S4得到的标准曲线,以得到样品中的苯佐卡因浓度; 所述步骤S1中多巴胺浓度为20mM,氯化铁浓度为0.5mM,亚铁氰化钾浓度为1~5mM,盐酸浓度为0.4~0.8M,原位生长普鲁士蓝纳米酶反应时间为10~50min。
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