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青岛海洋生物医药研究院股份有限公司;中国海洋大学胡淑曼获国家专利权

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龙图腾网获悉青岛海洋生物医药研究院股份有限公司;中国海洋大学申请的专利一种利用指纹图谱检测黄鱼鳔的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116223702B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310037842.3,技术领域涉及:G01N30/86;该发明授权一种利用指纹图谱检测黄鱼鳔的方法是由胡淑曼;杨雪;杨文哲;张鹏;魏宝红;马晓青;孙皓岩;管华诗设计研发完成,并于2023-01-07向国家知识产权局提交的专利申请。

一种利用指纹图谱检测黄鱼鳔的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种利用指纹图谱检测黄鱼鳔的方法,包括以下步骤:步骤1:黄鱼鳔供试品溶液的制备;步骤2:精密定量吸取供试品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图;步骤3:将步骤2中获得的黄鱼鳔指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统,选择不同批次黄鱼鳔供试品色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰,采用平均值计算法生成黄鱼鳔的对照指纹图谱;步骤4:对黄鱼鳔指纹图谱中的典型共有峰进行液相制备分离纯化,获得代表性多肽成分;步骤5:基于液质联用分析代表性多肽,根据质谱碎裂特点及碎片离子信息与数据库进行比对,从而实现样品的表征。本发明所提供的黄鱼鳔指纹图谱,能全面、客观地表征黄鱼鳔的质量,能够用于鱼鳔品种的真伪鉴定。

本发明授权一种利用指纹图谱检测黄鱼鳔的方法在权利要求书中公布了:1.一种利用指纹图谱检测黄鱼鳔的方法,其特征在于,包括如下步骤: 步骤1、黄鱼鳔供试品溶液的制备:取不同批次的黄鱼鳔供试品,分别称取一定重量的供试品置于容器中,加水于4℃条件下泡发,供试品与水的质量体积比为1:100~1:200,破壁机匀浆,氢氧化钠调节pH=7~7.5,加胰酶酶解,酶活力为3~5Ug,37℃,100~200rmin条件下震荡恒温酶解3h,酶解液煮沸10min灭活,酶解液离心,取上清液,减压浓缩,用体积百分数为0.05~0.15%甲酸水转移,C18固相萃取柱进行除盐处理,流程为:乙腈活化,用体积百分数为0.05%~0.15%的三氟乙酸水溶液平衡,上样,用两倍柱体积的体积百分数为0.05%~0.15%的三氟乙酸水溶液淋洗,3倍柱体积含体积百分数为0.05%~0.15%的三氟乙酸的30%乙腈水溶液洗脱,收集洗脱液,减压浓缩至干,残渣加含体积百分数为0.05%~0.15%的甲酸的30%乙腈溶液复溶,离心,取上清液,即得; 步骤2、分别精密吸取步骤1中的供试品溶液注入液相色谱仪,记录色谱图;液相色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温30~40℃,以A:甲酸乙腈-B:甲酸水为流动相,梯度洗脱,洗脱梯度为0~5min,0%A;5~18min,0%~5%A;18~25min,5%~6.5%A;25~28min,6.5%~9%A;28~32min,9%~12%A;32~36min,12%A;36~42min,12%~13.5%A;42~45min,13.5%~16%A;45~55min,16%~20%A;55~65min,20%~25%A;流速0.9~1.1mL·min-1,进样体积为1~20μL,Alltech2000ES蒸发光散射检测器进行检测,蒸发光散射检测器参数:漂移管温度110~120℃,载气流速2.5~3.5mL·min-1;或安捷伦1260蒸发光散射检测器,蒸发光散射检测器参数:漂移管温度:40~45℃,载气压力:3.0~3.5bar,Gain:6~7; 步骤3、将步骤2中获得的黄鱼鳔供试品指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统;选择不同批次黄鱼鳔色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰;用平均值计算法生成黄鱼鳔的对照指纹图谱,计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积;结果应符合以下标准:供试品指纹图谱中共18个共有峰,供试品图谱与对照指纹图谱一致,按中药色谱指纹图谱相似度评价系统,供试品指纹图谱与对照指纹图谱经相似度计算软件计算,相似度不低于0.9,且所述供试品指纹图谱中的18个共有峰,以4号参照物峰相应的色谱峰为S峰,计算各共有峰的相对保留时间应符合:1号峰0.561~0.563,2号峰0.630~0.632,3号峰0.772~0.775,S峰1.000,5号峰1.579~1.586,6号峰2.738~2.749,7号峰4.076~4.095,8号峰4.275~4.296,9号峰4.464~4.489,10号峰4.608~4.747,11号峰5.238~5.260,12号峰5.482~5.508,13号峰8.326~8.366,14号峰8.591~8.628,15号峰8.780~8.822,16号峰9.058~9.100,17号峰9.274~9.319,18号峰10.528~10.580;各共有峰与S峰取LOG值后的相对峰面积应符合:1号峰0.796~0.869,2号峰0.846~0.950,3号峰0.885~0.973,S峰1.000,5号峰0.831~0.904,6号峰0.914~1.006,7号峰0.991~1.073,8号峰0.949~1.007,9号峰0.960~1.044,10号峰0.956~1.029,11号峰0.988~1.073,12号峰0.973~1.051,13号峰1.059~1.135,14号峰1.097~1.177,15号峰1.042~1.141,16号0.970峰~1.033,17号峰1.051~1.124,18号峰0.889~0.968。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人青岛海洋生物医药研究院股份有限公司;中国海洋大学,其通讯地址为:266071 山东省青岛市崂山区香港东路23号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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