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龙图腾网获悉南方医科大学南方医院申请的专利一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116298011B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310252276.8，技术领域涉及：G01N30/06；该发明授权一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法是由官键;李楠设计研发完成，并于2023-03-16向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法，包括如下步骤：S1材料活化、S2材料悬浊、S3检测样本孵育、S4蛋白洗脱与酶解、S5前处理、S6检测。本发明的检测方法，降低了高丰度蛋白的干扰，能够使得检测的结果更为全面和准确，填补了体液中高密度低丰度蛋白质检测方法上的空白。

本发明授权一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法在权利要求书中公布了：1.一种体液中高密度低丰度蛋白的检测方法，其特征在于包括如下步骤： S1材料活化：利用活化剂对纳米级分子筛进行活化处理10-20min，所述活化剂包括按照重量百分数计的如下组分：乙腈0-20%、甲醇60-80%、乙醇0-30%、水0-40%；所述活化剂与纳米分子筛的质量比为10-6000:1； S2材料悬浊：将经过S1步骤处理过的纳米级分子筛加入第一缓冲液中，震荡形成悬浊液；所述纳米分子筛与第一缓冲液的质量比为1:1-100； S3检测样本孵育：将待检测的体液样本加入步骤S2得到的悬浊液中，混合均匀后在37±1℃的温度下震荡孵育5-30min，得到孵育液；所述体液样本与悬浊液的体积比为：V体液样本：V悬浊液=1:2-50； S4蛋白洗脱与酶解：将步骤S3得到的孵育液离心5-45min，弃上清，取沉淀物，将所述沉淀物加入第二缓冲液中并在90±5℃震荡孵育10-30min，所述沉淀物与第二缓冲液的质量比为1:2-50；然后加入胰蛋白酶在28-40℃的温度下酶解1-3h，然后再次加入胰蛋白酶在30-40℃的温度下酶解1-3h，接着加入甲酸或乙酸终止酶解，得到酶解液； S5前处理：将步骤S4得到的酶解液依次进行除盐和抽干处理，得到抽干肽段； S6检测：将步骤S5得到的抽干肽段复溶，然后进行LC-MS蛋白质谱检测； 所述步骤S2中的第一缓冲液包括：0-50mmolL的尿素、0-30mmolL的Tris-HCl、0-200mmolL的柠檬酸钠、1-10mmolL的EDTA、100-300mmolL的KCl、100-500mmolL的NaCl、以及按照重量百分数计0-5%的CHAPS、余量为质谱级水，所述第一缓冲液的pH值=6-8； 所述步骤S4中的第二缓冲液包括按摩尔体积比计的10-400mmolL的DTT、10-40mmolL的IAA，以及水和NH4HCO3，所述水的质量为m1，所述NH4HCO3的重量为m2，m1：m2：=90-99：1-10，所述第二缓冲液的pH值=7-9。

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