海南大学三亚南繁研究院文鑫获国家专利权
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龙图腾网获悉海南大学三亚南繁研究院申请的专利一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离和培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120098897B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510593473.5,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离和培养方法是由文鑫;姜天宇;骆剑设计研发完成,并于2025-05-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离和培养方法在说明书摘要公布了:本发明涉及细胞分离培养技术领域,特别是涉及一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离和培养方法。本发明首次创建了一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离方法,本发明使用EDTA消化液预消化豹纹鳃棘鲈鱼鳍外层的表皮细胞,再用胶原酶消化液消化内部真皮的结缔组织色素细胞,而不使用胰蛋白酶等对细胞损伤大的消化酶和其他机械方法,能够减小细胞损伤,可以有效地分离得到高纯度、活性良好且可以进行体外培养的豹纹鳃棘鲈红色素细胞,为后续的单细胞测序、细胞体外培养以及分子功能验证等实验奠定基础。
本发明授权一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离和培养方法在权利要求书中公布了:1.一种豹纹鳃棘鲈红色素细胞的分离方法,其特征在于,由以下步骤组成: 取豹纹鳃棘鲈的鱼鳍,依次进行第一消化、第二消化和密度梯度离心,得到所述豹纹鳃棘鲈红色素细胞; 所述第一消化采用的消化液为0.04wt%EDTA消化液;所述第二消化采用的消化液为胶原酶消化液;所述胶原酶消化液由1mgmL胶原酶IV、0.1mgmLDNaseI和10mgmL牛血清白蛋白,溶解于PBS制成; 所述密度梯度离心采用的介质为Percoll溶液; 所述第一消化的时间为20-30min,温度为25℃-28℃,转速为200rpm; 所述第二消化的时间为2h,温度为25℃-28℃,转速为60rpm; 所述密度梯度离心为依次加入体积百分含量为20%的Percoll溶液和体积百分含量为30%的Percoll溶液; 所述密度梯度离心后,所述红色素细胞位于体积百分含量为20%的Percoll溶液和体积百分含量为30%的Percoll溶液的交界面; 所述鱼鳍为尾鳍、背鳍和臀鳍中的一种或几种。
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