河南大学三亚研究院;河南大学;军事科学院系统工程研究院军需工程技术研究所;三全食品股份有限公司黄继红获国家专利权
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龙图腾网获悉河南大学三亚研究院;河南大学;军事科学院系统工程研究院军需工程技术研究所;三全食品股份有限公司申请的专利一种凝胶型麦胚无细胞蛋白体系表达血管内皮生长因子的方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121249825B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511816534.6,技术领域涉及:C12P21/02;该发明授权一种凝胶型麦胚无细胞蛋白体系表达血管内皮生长因子的方法和应用是由黄继红;刘明;刘晋;周靖波;侯银臣;廖爱美;潘龙;田海龙;张芯蕊;冯志强;邢玉荣;肖冉;李小林;杨金初设计研发完成,并于2025-12-04向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种凝胶型麦胚无细胞蛋白体系表达血管内皮生长因子的方法和应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物技术领域,涉及一种凝胶型麦胚无细胞蛋白体系表达血管内皮生长因子的方法和应用。本发明选用羧甲基壳聚糖和透明质酸为原料,经过对力学和生物相容性参数的配方优化后,无细胞蛋白质合成体系组分被整合到该双网络架构中,形成了一个能够通过封装mRNA的合成实现持续血管内皮生长因子表达的体系,该有效缓解了突释毒性,同时实现了受控的治疗递送。此外,无细胞蛋白质合成体系的开放性质允许根据核酸模板进行可编程的生物合成,从而表达各种功能性蛋白质,这大大扩展了其转化应用的潜力。
本发明授权一种凝胶型麦胚无细胞蛋白体系表达血管内皮生长因子的方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种凝胶型麦胚无细胞蛋白体系表达血管内皮生长因子的方法,其特征在于,步骤为: 1将巯基化羧甲基壳聚糖与马来酰亚胺基氧化透明质酸混合,旋涡后静置得到多功能双组份水凝胶;所述混合采用的溶剂为1×翻译补充液; 所述马来酰亚胺基氧化透明质酸是将氧化透明质酸、1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基丁二酰亚胺与N-2-氨基乙基马来酰亚胺在酸性条件下室温搅拌反应,反应结束后经稀盐酸溶液透析、冻干后得马来酰亚胺基氧化透明质酸; 2将模板mRNA、麦胚抽提液和磷酸激酶混合之后加入到步骤1的多功能双组份水凝胶中,得凝胶型麦胚无细胞蛋白体系,室温反应后得即得血管内皮生长因子; 所述模板mRNA的序列如SEQIDNo.7+SEQIDNo.1+SEQIDNo.8、SEQIDNo.7+SEQIDNo.2+SEQIDNo.8、SEQIDNo.7+SEQIDNo.3+SEQIDNo.8、SEQIDNo.7+SEQIDNo.4+SEQIDNo.8或SEQIDNo.7+SEQIDNo.5+SEQIDNo.8所示; 所述步骤1中巯基化羧甲基壳聚糖的浓度为3~5wt%;马来酰亚胺基氧化透明质酸的浓度为3~5wt%;巯基化羧甲基壳聚糖与马来酰亚胺基氧化透明质酸室温体积比为1:2~1:4.5;所述羧甲基壳聚糖的羧基取代度80%;透明质酸的分子量为400000~800000;所述1×翻译补充液的配方为:120mM4-羟乙基哌嗪乙磺酸,400mM乙酸钾,10.8mM乙酸镁,1.6mM亚精胺,10mM二硫苏糖醇,1.2mM氨基酸标准液,4.8mM三磷酸腺苷,1mM鸟苷三磷酸,64mM磷酸肌酸; 所述步骤2中模板mRNA的尾部均添加了编码6个组氨酸的DNA标签;模板mRNA、麦胚抽提液和磷酸激酶的体积比例为1:1:0.05;磷酸激酶的浓度为20mgmL;模板mRNA浓度≥1μgμL;麦胚抽提液的A260值为95-105。
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