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中国食品药品检定研究院淡墨获国家专利权

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龙图腾网获悉中国食品药品检定研究院申请的专利体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN109423472B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201710723291.0,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用是由淡墨;卢贤欢设计研发完成,并于2017-08-22向国家知识产权局提交的专利申请。

体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用在说明书摘要公布了:本发明涉及一种体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用,属于药物评价技术领域。该方法包括以下步骤:细胞培养:将HepaRG细胞和人肝星形细胞分别进行细胞培养,备用;细胞诱导:将上述HepaRG细胞接种于培养瓶内进行细胞培养,待HepaRG细胞贴壁生长至预定数量后,更换为诱导培养基进行诱导培养,得到经诱导的HepaRG细胞,备用;模型构建:将经诱导的HepaRG细胞和人肝星形细胞制成混合细胞悬液,接种于预定载体上,培养,得到具肝小球三维结构的微组织,即得3D肝脏模型。该模型具肝小球的肝脏三维结构的微组织,能够很好的模拟体内肝脏的实际生理情况,从而准确预测药物的肝脏毒性。

本发明授权体外3D肝脏模型和肠肝共培养模型及其建立方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种体外3D肝脏模型的建立方法,其特征在于,包括以下步骤: 细胞培养:将HepaRG细胞和人肝星形细胞分别进行细胞培养,备用; 细胞诱导:将上述HepaRG细胞接种于培养瓶内进行细胞培养,待HepaRG细胞贴壁生长至预定数量后,更换为诱导培养基进行诱导培养,得到经诱导的HepaRG细胞,备用; 模型构建: 1制备混合细胞悬液:将经过诱导的HepaRG细胞和人肝星形细胞制备为每60μl含4×105-6×105个HepaRG和0.2×105-1.2×105个人肝星形细胞的混合细胞悬液,所述混合细胞悬液中HepaRG细胞和人肝星形细胞的数量比为8:1-12:1; 2接种:将所述混合细胞悬液按照15-25μl孔的量滴加至细胞培养板中,再将CelluSponge3D培养支架置于上述细胞悬液上,随后再按照30-50μl孔的量将上述混合细胞悬液滴加至所述3D培养支架上,洗吹液体以使所述CelluSponge3D培养支架两侧的细胞接种均匀; 3培养:将上述接种细胞后的细胞培养板置于35-39℃,含4-6%CO2和相对湿度为85-95%的培养箱内静置稳定3-5h,随后加入培养基浸没所述3D培养支架,孵育12-36h; 4模型建立:将上述孵育后的3D培养支架转移至另一细胞培养板中,补充培养基,并定时更换培养基,培养,得到具肝小球三维结构的微组织,即得3D肝脏模型; 所述HepaRG细胞和人肝星形细胞的培养基均为含2-20%胎牛血清的RPMI1640完全培养基; 所述细胞诱导步骤中,所述诱导培养基为含0.5-3%DMSO和2-20%胎牛血清的完全培养基。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国食品药品检定研究院,其通讯地址为:100176 北京市大兴区亦庄宏达中路甲8号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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