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龙图腾网获悉中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所申请的专利一种检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的引物探针组及试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116254355B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-03-31发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310063130.9，技术领域涉及：C12Q1/689；该发明授权一种检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的引物探针组及试剂盒是由马学军;赵雁林;张瑞卿;申辛欣;欧喜超设计研发完成，并于2023-01-16向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的引物探针组及试剂盒在说明书摘要公布了：本发明提供一种检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的引物探针组及试剂盒，属于分子生物学检测技术领域。本发明所述引物探针组包括包括靶向rpoB基因的RAA引物和qPCR引物、靶向野生型rpoB基因的探针引物和靶向突变型rpoB基因的探针引物。本发明依次采用RT‑RAA和qPCR的检测手段，结合上述特异性引物探针组可同时快速检测结核分枝杆菌rpoB基因的516、526、531和533位点，特异性好，检测灵敏度能达到5拷贝ul，比qPCR100拷贝ul的灵敏度提高了20倍，且对于异质性耐药的突变检测能力为5％；该检测方法还可大大缩短检测时间。

本发明授权一种检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的引物探针组及试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种非疾病诊断目的的检测结核分枝杆菌利福平耐药基因的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1提取待测样品的核酸； 2以所述核酸为模板，采用引物探针组，依次进行RAA扩增和qPCR扩增，收集荧光信号；所述RAA扩增和qPCR扩增的扩增体系采用正二十二烷进行间隔；所述RAA扩增和qPCR扩增均在敏感管和耐药管里进行； 3根据敏感管和耐药管荧光扩增曲线结果，判定待测样品的耐药情况； 所述引物探针组包括靶向rpoB基因的RAA引物和qPCR引物、靶向野生型rpoB基因的探针引物和靶向突变型rpoB基因的探针引物； 所述靶向rpoB基因的RAA引物和qPCR引物包括：RAA-F、RAA-R、qPCR-F和qPCR-R；所述RAA-F、RAA-R、qPCR-F和qPCR-R的核苷酸序列依次如SEQIDNO.1~SEQIDNO.4所示； 所述靶向野生型rpoB基因的探针引物包括：WT1-P、WT2-P和WT3-P；所述WT1-P的核苷酸序列为ATGG+A+CCAGAA+CAAC、所述WT2-P的核苷酸序列为ACCC+ACAAGCG+C+CGA和所述WT3-P的核苷酸序列为ACT+GT+CGGCGCTG；所述靶向突变型rpoB基因的探针引物包括：MUT1-P、MUT2A-P、MUT2B-P和MUT3-P；所述MUT1-P的核苷酸序列为ATGG+T+CCAGAA+CAAC、所述MUT2A-P的核苷酸序列为ACCG+ACAAGCG+C+CGA、所述MUT2B-P的核苷酸序列为ACCT+ACAAGCG+C+CGA和所述MUT3-P的核苷酸序列为ACT+GT+TGGCGCTG；其中所述+号后的碱基为锁核酸修饰探针； 所述敏感管中qPCR扩增的反应体系以40μl计，包括以下组分：Buffer12.5μl、无核酶水10.7μl、Taq热启动酶0.5μl、dNTPs0.6μl、MgCl21.2μl、qPCR-F5μl、qPCR-R5μl、WT1-P1.5μl、WT2-P1μl和WT3-P2μl；所述耐药管中qPCR扩增的反应体系以40μl计，包括以下组分：Buffer12.5μl、无核酶水6.7μl、Taq热启动酶0.5μl、dNTP0.6μl、MgCl21.2μl、qPCR-F5μl、qPCR-R5μl、MUT1-P1.5μl、MUT2A-P3μl、MUT2B-P1μl和MUT3-P3μl； 所述敏感管和耐药管中RAA扩增和qPCR扩增的扩增体系采用正二十二烷进行间隔。

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