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武克·萨夫科维奇;克里斯蒂安·D·埃茨;李涵泺武克·萨夫科维奇获国家专利权

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龙图腾网获悉武克·萨夫科维奇;克里斯蒂安·D·埃茨;李涵泺申请的专利培养间充质干细胞的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114729313B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202080064531.0,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权培养间充质干细胞的方法是由武克·萨夫科维奇;克里斯蒂安·D·埃茨;李涵泺;扬-克里斯托夫·西蒙;玛丽·施耐德设计研发完成,并于2020-07-15向国家知识产权局提交的专利申请。

培养间充质干细胞的方法在说明书摘要公布了:本发明提供了从毛囊外根鞘中获得和扩增间充质干细胞MSCORS的方法。本发明进一步提供了将扩增的干细胞分化为其他细胞和组织的方法,同时提供了可通过本方法获得的各种细胞。

本发明授权培养间充质干细胞的方法在权利要求书中公布了:1.一种产生间充质干细胞的方法,包括以下步骤: i切除拔取毛发的毛囊球; ii将毛囊的剩余部分与胶原蛋白酶一起孵育,以获得包含干细胞和部分降解胞外基质的毛囊; iii将步骤ii中获得的毛囊,使用第一培养基,在Transwell透液膜上培养,以允许干细胞从毛囊中迁出,在诱导干细胞增殖而不诱导其分化的条件下;和 iv使用第二培养基,在不透液的固体基质上进一步培养从步骤iii获得的干细胞,该培养基诱导干细胞增殖而不诱导其分化; 其中, 所述的第一培养基的组成为:低葡萄糖DMEM88%,人类血清10%,ITSPremix1%,成纤维生长因子10ngml,重组人表皮生长因子20ngml,L-谷氨酰胺2mM,1%Sigma-Aldrich提供的体积浓度的青霉素链霉素青霉素100Uml、链霉素100μgml; 所述的第二培养基的组成为:低葡萄糖DMEM89%,胎牛血清10%,成纤维生长因子10ngml,重组人表皮生长因子20ngml,L-谷氨酰胺2mM,IL-610ngml,1%Sigma-Aldrich提供的体积浓度的青霉素链霉素青霉素100Uml、链霉素100μgml; 所述的培养在低氧条件下进行,所述的低氧条件指氧浓度低于20%; 步骤iii的培养进行14至25天,在培养3周内细胞层融合,从透液膜上收获细胞,以获得细胞悬浮液;多步胰蛋白酶消化的收获方法如下:吸出透液膜两侧上腔室和下腔室的培养基,加入预热的PBS润洗;轻轻冲洗细胞层和毛囊,重复冲洗步骤3次;在膜上加入0.5ml0.04%0.03%胰蛋白酶EDTA,孵育6~8分钟,显微镜下观察;当许多细胞收缩成球状时,轻轻敲击6孔板,用移液器轻轻冲洗细胞层;收集上清液并吸入含有0.5mlFBS的15ml离心管中以中和反应;在Transwell中再加入0.5ml胰蛋白酶EDTA,重复胰蛋白酶消化过程2~3次,直到透液膜上的细胞全部脱落;将所有上清液连同细胞收集到同一个15ml锥形管中,并再次加入0.5mlFBS以中和反应; 步骤iv的培养进行21天至35天。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人武克·萨夫科维奇;克里斯蒂安·D·埃茨;李涵泺,其通讯地址为:德国莱比锡,胡斯曼大街3号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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