苏州优逸兰迪生物科技有限公司朱海霞获国家专利权
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龙图腾网获悉苏州优逸兰迪生物科技有限公司申请的专利一种PE/荧光串联染料及其制备方法与标记抗体的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115873082B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211676580.7,技术领域涉及:C07K14/405;该发明授权一种PE/荧光串联染料及其制备方法与标记抗体的方法是由朱海霞;钱近春;夏继波设计研发完成,并于2022-12-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种PE/荧光串联染料及其制备方法与标记抗体的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种PE荧光串联染料及其制备方法与标记抗体的方法,对藻红蛋白上的游离巯基作封闭处理;再进行小分子有机染料串联处理;然后对获得的串联染料进行蛋白保护处理;最后采用交联剂进行活化处理;得到一种PE荧光串联染料。进行抗体标记时,先采用还原剂对目标抗体进行巯基化处理;再将巯基化的目标抗体与活化后的串联染料进行交联;然后向交联完成的串联染料‑抗体体系中加入封闭剂进行染料封闭处理,并保存荧光抗体,完成抗体标记。PE、小分子有机染料通过共价键结合,供体PE被激发器发出的激光激发,激发后发射出的能量传递至小分子有机染料,使其激发出特定波长的光线,是一种具有独特的荧光团的荧光染料。
本发明授权一种PE/荧光串联染料及其制备方法与标记抗体的方法在权利要求书中公布了:1.一种PE荧光串联染料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: 1将巯基封闭的藻红蛋白与小分子有机染料反应,得到染料PE; 2将染料PE上的羧基活化后与稳定剂反应,得到稳定性染料PE; 3将稳定性染料PE与交联剂反应,得到PE荧光串联染料; 利用封闭剂将藻红蛋白的巯基封闭,得到巯基封闭的藻红蛋白;封闭剂、藻红蛋白的摩尔比为1∶50~80;封闭时的反应温度为15~35℃、时间为1~3小时,或者封闭时的反应温度为4℃、时间为10~20小时;巯基封闭的藻红蛋白与小分子有机染料的摩尔比为1∶10~30;巯基封闭的藻红蛋白与小分子有机染料反应的温度为15~35℃、时间为10~60分钟;所述小分子有机染料为罗丹明染料或菁染料中的任意一种;所述封闭剂为NEM、MEA、半胱胺盐酸盐任意一种或多种组合; 采用EDC、NHS将染料PE上的羧基活化;羧基活化后的染料PE与稳定剂反应时,染料PE、稳定剂的用量比例为2.5~5g∶0.1~1mol,反应温度为15~35℃、时间为1~5小时,或者反应温度为4℃、时间为10~20小时;所述稳定剂为组氨酸、甘精肽、木糖醇或者海藻糖; 稳定性染料PE与交联剂的摩尔比为1∶20~80;反应的温度为15~35℃、时间为0.5~4小时;所述交联剂为SMCC、SMPEG2、SMPEG4、SMPEG6、SMPEG8、SMPEG12、SMPEG24、SMPB、AMAS、GMBS、MBS、EMCS、BMPS、SPDP、LC-SPDP、PEG4-SPDP、PEG12-SPDP、碳二亚胺中的任意一种。
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