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中国中医科学院中药研究所王彩霞获国家专利权

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龙图腾网获悉中国中医科学院中药研究所申请的专利一种重组酵母菌及其在发酵生产β-榄香烯中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119875866B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510361035.6,技术领域涉及:C12N1/19;该发明授权一种重组酵母菌及其在发酵生产β-榄香烯中的应用是由王彩霞;陈士林;张悦;郝学密;侯康鑫;张烽设计研发完成,并于2025-03-26向国家知识产权局提交的专利申请。

一种重组酵母菌及其在发酵生产β-榄香烯中的应用在说明书摘要公布了:本发明涉及微生物技术领域,具体公开了一种重组酵母菌及其在发酵生产β‑榄香烯中的应用。本发明的重组酵母菌,与出发酵母菌株相比,表达法尼基二磷酸合酶ERG20、莴苣来源的倍半萜合酶LsLTC2和玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶RrFPS,并在过氧化物酶体中表达IDI1、ERG13、ERG8、ERG10、ERG12、MVD1和tHMGR。优选,使细胞基质内的鲨烯合酶ERG9的表达量进一步下调、过表达ERG10、ERG13和IDI1、并表达XFPK、PTA、POXB和ACS。本发明的重组酵母菌,其可高效生产β‑榄香烯,为β‑榄香烯的工业化生产提供了更有效的方法。

本发明授权一种重组酵母菌及其在发酵生产β-榄香烯中的应用在权利要求书中公布了:1.一种发酵生产β-榄香烯的方法,其特征在于,包括培养重组酵母的步骤; 所述重组酵母的构建方法具体为: 1将法尼基二磷酸合酶ERG20和莴苣来源的倍半萜合酶LsLTC2的编码基因进行融合,构建融合基因ERG20~LcLTC2; 2将2个拷贝数的所述融合基因ERG20~LcLTC2整合到出发酿酒酵母菌株的rDNA位点中,获得酵母菌株YB-1; 3将酿酒酵母内源的MVA途径关键基因IDI1、ERG13、ERG8、ERG10、ERG12、MVD1、tHMGR的C端分别插入ePTS1定位信号肽基因,并整合到酵母菌株YB-1染色体的TY3位点,获得酵母菌株YB-2; 4将6个拷贝数的所述融合基因ERG20~LcLTC2整合至酵母菌株YB-2染色体的delta位点上,获得酵母菌株YB-3; 5将6个拷贝数的玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶RrFPS的编码基因整合到酵母菌株YB-3染色体的gal80位点上,获得酵母菌株YB-4; 6在所述酵母菌株YB-4的鲨烯合酶ERG9的编码基因N端插入泛素化标签UbiF,同时用HXT1启动子替换ERG9启动子,获得酵母菌株YB-5,所述泛素化标签UbiF的序列如SEQIDNo.88所示; 7在所述酵母菌株YB-5的X2位点整合3个拷贝数的所述融合基因ERG20~LcLTC2,得到酵母菌株YB-6; 8在所述酵母菌株YB-6的X3位点整合ERG10、ERG13基因,得到酵母菌株YB-7; 9在所述酵母菌株YB-7的LPP1位点整合XFPK、PTA基因,得到酵母菌株YB-8; 10在所述酵母菌株YB-8的DPP1位点整合2个拷贝数的IDI1基因,得到酵母菌株YB-9; 11在所述酵母菌株YB-9的ROX1位点整合POXB、ACS基因,得到酵母菌株YB-10; 所述重组酵母的出发菌株为酿酒酵母CEN.PK2-1D; 所述法尼基二磷酸合酶ERG20的GenBank登录号为NP_012368.1; 所述莴苣来源的倍半萜合酶LsLTC2的编码基因的GenBank登录号为AF489964.1; 所述玫瑰来源的双功能法尼基二磷酸合酶RrFPS的编码基因的GenBank登录号为KP768082.1; 所述IDI1的GenBank登录号为NP_015208.1; 所述ERG13的GenBank登录号为NP_013580.1; 所述的ERG8的GenBank登录号为NP_013947.1; 所述ERG10的GenBank登录号为NP_015297.1; 所述的ERG12的GenBank登录号为NP_013935.1; 所述的MVD1的GenBank登录号为NP_014441.1; 所述tHMGR的GenBank登录号为JX648390.1; 所述鲨烯合酶ERG9的GenBank登录号为NP_012060.1; 所述XFPK的GenBank登录号为CBL90649.1; 所述PTA的GenBank登录号为QBJ74152.1; 所述POXB的GenBank登录号为NP_418139.1; 所述ACS的编码基因的GenBank登录号为AT5G36880; 所述方法通过优化发酵条件,将菌液接种至Delft培养基发酵12h后,添加半乳糖母液,使罐内半乳糖浓度达到20gL;24h后开始流加乙醇,维持乙醇浓度在3-5gL,并加入10%正十二烷进行两相发酵;经过7天发酵得到β-榄香烯; 所述优化发酵条件为:pH5.0-6.5,溶氧30%-50%,温度28-30℃。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国中医科学院中药研究所,其通讯地址为:100700 北京市东城区东直门内南小街16号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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