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山东省第二人民医院(山东省耳鼻喉医院、山东省耳鼻喉研究所)刘闻闻获国家专利权

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龙图腾网获悉山东省第二人民医院(山东省耳鼻喉医院、山东省耳鼻喉研究所)申请的专利一种构建内耳前体细胞及内耳类器官的方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120536366B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511037461.0,技术领域涉及:C12N5/0793;该发明授权一种构建内耳前体细胞及内耳类器官的方法和应用是由刘闻闻;孙高英;徐磊;王海波设计研发完成,并于2025-07-28向国家知识产权局提交的专利申请。

一种构建内耳前体细胞及内耳类器官的方法和应用在说明书摘要公布了:本发明涉及一种构建内耳前体细胞及内耳类器官的方法和应用,具体地,内耳前体细胞的制备方法,其包括以下步骤:S1:在第一培养基存在条件下,与细胞外基质接触培养人多能干细胞,所述第一培养基为含有BMP、FGF和TGFβ信号传导抑制剂的基础培养基;S2:在含有BMP抑制剂、Wnt信号传导抑制剂的第一培养基中培养S1获得的细胞,分化得到所述内耳前体细胞。本发明提供的方法获得内耳前体细胞在低温保存后依然能够分化为成熟的内耳神经元类器官,且批间差异小。

本发明授权一种构建内耳前体细胞及内耳类器官的方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种从多能干细胞不连续分化为内耳类器官的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤: S1:在第一培养基存在条件下,与细胞外基质接触培养人多能干细胞1~3天,所述第一培养基为含有骨形态发生因子BMP4、成纤维细胞生长因子bFGF和SB-431542的基础培养基,所述BMP4工作浓度为10ngmL,bFGF工作浓度为8~12ngmL,SB-431542工作浓度为0.8~1.5μM; S2:在含有LDN-193189、IWP-2的第一培养基中培养S1获得的细胞4~8天,分化得到内耳前体细胞;将所述内耳前体细胞进行冷冻保存,所述LDN-193189工作浓度为0.1μM,IWP-2工作浓度为1~5μM; S3:将冻存的所述的内耳前体细胞进行复苏; S4:将S3步骤复苏后的内耳前体细胞悬浮于第三培养基中培养4~8天,所述第三培养基为包含CHIR99021、FGF2、IGF-1、Y-27632的基础培养基,所述CHIR99021工作浓度为2~4μM,FGF2工作浓度为8~12ngmL,IGF-1的工作浓度为45~55ngmL,Y-27632工作浓度为8~12μM; S5:将S4步骤悬浮培养后的细胞于第四培养基中培养5~9天,所述第四培养基为包含ATRA、SHH、bFGF、IGF-1、EGF的基础培养基,所述ATRA的工作浓度为0.5~1.5μM,SHH的工作浓度为480~520ngmL,bFGF工作浓度为8~12ngmL,IGF-1工作浓度为45~55ngmL,EGF的工作浓度为15~25ngmL; S6:将S5步骤培养后的细胞于第五培养基中培养,获得所述内耳类器官,所述第五培养基为包含db-cAMP、BDNF、NT3、IGF-1、Y-27632的基础培养基,所述db-cAMP工作浓度为90~110μM,BDNF工作浓度为15~25ngmL,NT3工作浓度为15~25ngmL,IGF-1工作浓度为20ngmL,Y-27632工作浓度为8~12μM。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人山东省第二人民医院(山东省耳鼻喉医院、山东省耳鼻喉研究所),其通讯地址为:250022 山东省济南市槐荫区段兴西路4号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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