中国科学院地理科学与资源研究所刘媛媛获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院地理科学与资源研究所申请的专利在线柱前衍生耦合液质联用的氨基酸检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121410173B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511975909.3,技术领域涉及:G01N30/88;该发明授权在线柱前衍生耦合液质联用的氨基酸检测方法是由刘媛媛;张倩;张宏志设计研发完成,并于2025-12-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本在线柱前衍生耦合液质联用的氨基酸检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开在线柱前衍生耦合液质联用的氨基酸检测方法,涉及分析检测技术领域,包括获取待测样品进行蛋白质水解处理得到水解液;将水解液与衍生试剂混合,通过串联设置的多段反应区进行在线衍生反应,各反应区维持不同pH环境;在反应区出口设置在线检测单元监测衍生产物浓度并实时调节反应条件;将衍生反应液进行色谱分离;根据洗脱时间窗口切换离子源电离极性模式进行质谱检测;将质谱响应信号代入标准曲线计算氨基酸浓度值。本发明实现了氨基酸的自动化衍生和高灵敏度检测,具有操作简便、反应条件可控、检测效率高的优点。
本发明授权在线柱前衍生耦合液质联用的氨基酸检测方法在权利要求书中公布了:1.在线柱前衍生耦合液质联用的氨基酸检测方法,其特征在于,包括以下步骤: 获取待测样品并进行蛋白质水解处理,得到含有游离氨基酸的水解液; 将水解液与衍生试剂混合后依次通过串联设置的多段反应区进行在线衍生反应,各反应区针对不同解离常数的氨基酸维持不同的pH环境,得到含有氨基酸衍生物的衍生反应液; 在多段反应区的出口设置在线检测单元监测氨基酸衍生产物的生成浓度,根据所述生成浓度实时调节衍生试剂供给速率与反应区温度,得到含有氨基酸衍生物的流动相; 将含有氨基酸衍生物的流动相进行色谱分离,得到按照洗脱时间顺序分离的氨基酸衍生物组分; 根据氨基酸衍生物组分的洗脱时间窗口,在质谱检测过程中切换离子源的电离极性模式,使氨基酸衍生物组分在最优电离效率的模式下进行检测,获取质谱响应信号; 将质谱响应信号代入预设标准曲线,计算待测样品中氨基酸衍生物组分对应的氨基酸浓度值; 将水解液与衍生试剂混合后依次通过串联设置的多段反应区进行在线衍生反应,各反应区针对不同解离常数的氨基酸维持不同的pH环境,得到含有氨基酸衍生物的衍生反应液包括: 采用电化学检测器测定水解液中pH值,采用电导率检测器测定水解液中电导率,根据所述pH值与电导率生成水解液酸碱特性曲线; 根据酸碱特性曲线对水解液中游离氨基酸进行分类,确定游离氨基酸在串联设置的多段反应区中所需的pH环境,计算水解液与衍生试剂的用量; 将水解液与衍生试剂按照所述用量输送至涡流混合装置,所述涡流混合装置通过涡流剪切力使水解液与衍生试剂充分混合,形成混合反应液; 将缓冲溶液输送至串联设置的多段反应区,使所述多段反应区形成与不同游离氨基酸相适应的pH环境; 将混合反应液通过串联设置的多段反应区进行在线衍生反应,利用检测器实时监测多段反应区的pH变化,根据所述pH变化调节缓冲溶液补充量,维持所述多段反应区的pH环境,得到含有氨基酸衍生物的衍生反应液。
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