浙江大学林星宇获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116064742B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211550972.9,技术领域涉及:C12Q1/6844;该发明授权一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法是由林星宇;方玫;罗自生;徐艳群设计研发完成,并于2022-12-05向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法,属于数字化核酸培养技术领域。所述方法包括:1往待测样品环介导等温扩增反应体系中加入水凝胶单体丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺,引发交联形成水凝胶体系;2等温扩增反应;3扩增结束后,对水凝胶体系中形成的焦磷酸镁沉淀点进行识别计数,计算得出待测样品中的目标核酸分子的浓度。本发明将聚丙烯酰胺水凝胶和数字LAMP结合起来,利用PAM的吸附絮凝能力将LAMP反应副产物焦磷酸镁沉淀控制在核酸扩增团附近,形成与背景有明显颜色差别的白点,而且位置和大小跟核酸扩增团基本一致,实现了无染料肉眼可识别的核酸培养计数效果。
本发明授权一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法在权利要求书中公布了:1.一种无染料肉眼可识别的核酸培养检测计数方法,其特征在于,包括以下步骤: 1将待测样品加入到环介导等温扩增反应体系溶液中,再往反应体系中加入水凝胶单体,注入厚度为250~300μm的密封小室中,引发交联形成水凝胶体系;所述水凝胶单体包括丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺,所述丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的摩尔比为25~45:1,两者以总质量体积比5%~7%添加至反应体系中;所述环介导等温扩增反应体系包括特异性扩增目标核酸分子的引物; 2将水凝胶体系置于等温条件下加热进行环介导等温扩增反应,所述等温扩增反应的条件为60~70℃恒温加热30~40min; 3扩增结束后,对水凝胶体系中形成的焦磷酸镁沉淀点进行识别计数,计算得出待测样品中的目标核酸分子的浓度。
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