南京工业大学张迪获国家专利权
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龙图腾网获悉南京工业大学申请的专利一种提高dsRNA产量的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN121022706B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511545704.1,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一种提高dsRNA产量的方法是由张迪;柳东;顾姜欣;应汉杰;朱晨杰;陈勇;牛欢青设计研发完成,并于2025-10-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高dsRNA产量的方法在说明书摘要公布了:本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种提高dsRNA产量的方法。该方法适用于携带dsRNA表达载体的大肠杆菌表达系统,通过对发酵培养基中的碳氮源、磷酸盐、金属离子无机盐、维生素及效应物等多类组分进行系统优化,再结合发酵参数包括溶氧、补料策略及诱导时机的调控,使得dsRNA产量显著提升至了728mgL。该dsRNA发酵工艺具备卓越的可放大性与工业化应用潜力,为dsRNA的规模化、低成本生产提供了可靠的解决方案。
本发明授权一种提高dsRNA产量的方法在权利要求书中公布了:1.一种提高dsRNA产量的方法,其特征在于,将携带dsRNA表达载体的重组菌株的种子液接种于优化发酵培养基中进行发酵培养,当溶解氧值首次升高至80%以上且残糖浓度低于4gL时,补加碳源维持低糖水平,残糖浓度在0~5gL的范围内;并在菌体发酵至对数生长期时,添加诱导剂诱导dsRNA表达; 其中,所述携带dsRNA表达载体的重组菌株是以大肠杆菌为表达系统构建的,具体地,以大肠杆菌BL21DE3-△minC-△rnc为底盘菌株,过表达ERG基因融合片段得到的; 其中,所述ERG基因融合片段的核苷酸序列如SEQIDNO.7所示; 其中,所述优化发酵培养基,以LB培养基为基础培养基,额外添加金属离子无机盐、维生素、效应物得到的; 其中,所述金属离子无机盐由10mgL无水氯化钙、0.15mgL六水氯化钴、1.5mgL五水氯化铜、21mgL七水硫酸亚铁、3gL七水硫酸镁、1mgL一水硫酸锰、5mgL七水硫酸锌组成; 其中,所述维生素由0.5mgLVB1、0.1mgLVB2、0.1mgLVB3、0.1mgL烟酰胺、0.5mgLVB6、0.3mgLVB7、0.1mgLVB12组成; 其中,所述效应物由0.05gLL-色氨酸、0.5gL天冬氨酸、1gL苏氨酸、0.03gL甲硫氨酸、0.03gL异亮氨酸、1.5gL次黄嘌呤、1gL尿嘧啶组成。
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