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龙图腾网获悉丽水市绿谷生命健康研究院;浙江大学申请的专利一种基于人羊膜上皮干细胞构建组织工程化角膜的方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN121022744B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511553967.7，技术领域涉及：C12N5/079；该发明授权一种基于人羊膜上皮干细胞构建组织工程化角膜的方法及应用是由余路阳;黄佳男;蒋拓颖;姚克;李金英;刘佳设计研发完成，并于2025-10-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于人羊膜上皮干细胞构建组织工程化角膜的方法及应用在说明书摘要公布了：本发明提供了一种基于人羊膜上皮干细胞构建组织工程化角膜的方法及应用，属于生物技术领域。该方法包括：1将人羊膜上皮干细胞在角膜上皮细胞诱导分化培养基中培养得到人角膜上皮细胞样细胞；将人羊膜上皮干细胞在角膜基质细胞诱导分化培养基培养得到角膜基质细胞；2将步骤1得到的人角膜上皮细胞样细胞和角膜基质细胞分别接种于脱细胞角膜基质支架的表面和内部，共培养5天，构建组织工程化角膜。本发明首次将人羊膜上皮干细胞来源的两种角膜细胞同时接种于人脱细胞角膜基质，成功构建了组织工程化角膜，此外，分化所得的角膜细胞可接种于水凝胶等多种类型的生物材料，为开发各类新型人工角膜产品提供了更广泛的应用可能性。

本发明授权一种基于人羊膜上皮干细胞构建组织工程化角膜的方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种基于人羊膜上皮干细胞构建组织工程化角膜的方法，其特征在于，包括： 1将人羊膜上皮干细胞在角膜上皮细胞诱导分化培养基中培养5-20天，每两天换一次液，得到人角膜上皮细胞样细胞；将人羊膜上皮干细胞在角膜基质细胞诱导分化培养基中培养3-12天得到角膜基质细胞；所述角膜上皮细胞诱导分化培养基采用含有5-50ngmL的角质细胞生长因子、1μM视黄酸和1×双抗的CnT-PR-D上皮细胞分化培养基；所述角膜基质细胞诱导分化培养基采用含有1%胰岛素-转铁蛋白-硒、2mML-谷氨酰胺、1mM非必需氨基酸、1mM丙酮酸钠、0.05-2mM抗坏血酸-2-磷酸酯、5-20ngmL碱性成纤维细胞生长因子、1μM视黄酸和1×双抗的DMEMF12培养基； 2将步骤1得到的人角膜上皮细胞样细胞和角膜基质细胞分别接种于脱细胞角膜基质支架的表面和内部，共培养5天，构建组织工程化角膜，将人角膜上皮细胞样细胞接种于脱细胞角膜基质支架表面的方法为：取步骤1得到的人角膜上皮细胞样细胞，消化后制备成浓度为1×106个细胞200μL的单细胞悬液，将单细胞悬液滴加于脱细胞角膜基质支架表面，静置后人角膜上皮细胞样细胞自然沉降贴附于脱细胞角膜表面；将角膜基质细胞接种于脱细胞角膜基质支架的内部的方法为：将角膜基质细胞消化后制备成浓度为1×106个细胞200μL的单细胞悬液，用胰岛素针将单细胞悬液注射至脱细胞角膜基质支架的内部；共培养所使用的培养液为1:1混合的角膜上皮细胞诱导分化培养基和角膜基质细胞诱导分化培养基，培养环境为37℃、含5.5%CO2的细胞培养箱，期间每2天换液1次。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人丽水市绿谷生命健康研究院;浙江大学，其通讯地址为：323060 浙江省丽水市莲都区秀山路553号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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