湖南中医药大学李凯获国家专利权
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龙图腾网获悉湖南中医药大学申请的专利测序文库的构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116497462B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310416765.2，技术领域涉及：C40B50/06；该发明授权测序文库的构建方法是由李凯;廖端芳;齐捧;曾娅玲;林丽美;肖莉;何超平;传军设计研发完成，并于2023-04-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本测序文库的构建方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种测序文库的构建方法，该方法包括如下步骤：提供待测DNA的酶切片段；采用连接酶连接所述酶切片段和测序接头，并加入切刻酶，制备接头产物；以及以所述接头产物为模板进行PCR扩增，构建测序文库；其中，所述测序接头的核苷酸序列中包含所述切刻酶的酶切位点，所述切刻酶的酶切位点上游第一个碱基被特异性改变。采用本发明的方法，能够有效地防止测序接头之间发生自连，从而提高测序接头与待测片段的连接效率和测序数据的合格率。
本发明授权测序文库的构建方法在权利要求书中公布了：1.一种测序文库的构建方法，其特征在于，包括如下步骤： 提供待测DNA的酶切片段； 采用连接酶连接所述酶切片段和测序接头，并加入切刻酶，制备接头产物；所述切刻酶为Nt.BsmAI；以及 以所述接头产物为模板进行PCR扩增，构建所述测序文库； 其中，所述测序接头的核苷酸序列中包含所述切刻酶的酶切位点，所述切刻酶的酶切位点上游第一个碱基被特异性改变； 其中，采用a或b所示的方法制备所述待测DNA的酶切片段： a采用甲基化依赖性限制性内切酶对所述待测DNA进行酶切，制备酶切片段a；b采用非甲基化依赖性限制性内切酶对所述待测DNA进行酶切，制备酶切片段b； 所述酶切片段为酶切片段a的条件下，所述切刻酶的酶切位点上游第一个碱基被特异性改变成G，所述测序接头的核苷酸序列中包括NNNNGGAGAC；所述酶切片段为酶切片段b的条件下，所述切刻酶的酶切位点上游第一个碱基被特异性改变成A，所述测序接头的核苷酸序列中包括CGAGAGAC。
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