广州市娇兰化妆品有限公司李吉来获国家专利权
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龙图腾网获悉广州市娇兰化妆品有限公司申请的专利一种夏枯草或其革糖提取物中同时检测咖啡酸与迷迭香酸的方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117761171B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211173092.4,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种夏枯草或其革糖提取物中同时检测咖啡酸与迷迭香酸的方法与应用是由李吉来;董良春;朱梁希;梁丽方;张秋静设计研发完成,并于2022-09-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种夏枯草或其革糖提取物中同时检测咖啡酸与迷迭香酸的方法与应用在说明书摘要公布了:本发明公开一种夏枯草或其革糖提取物中同时检测咖啡酸与迷迭香酸的方法与应用。该方法利用薄层色谱法对夏枯草或其革糖提取物中咖啡酸与迷迭香酸同时进行定性鉴别;利用特定的极性溶剂提取法直接提取咖啡酸与迷迭香酸,再以咖啡酸与迷迭香酸混合对照品对照,用高效液相色谱法对夏枯草或其革糖提取物中的咖啡酸与迷迭香酸同时进行含量测定。该方法具有准确度和精密度高、稳定性和重复性好等优点,克服了以往夏枯草中咖啡酸与迷迭香酸成分同时检测时需要采用梯度洗脱的HPLC繁锁方法,提高了测定的准确性与重现性;本发明首次发现了夏枯草在制备其革糖提取物的工艺中具有革糖作用的咖啡酸成分显著提高,其对应的夏枯草折算含量提高了一倍以上。
本发明授权一种夏枯草或其革糖提取物中同时检测咖啡酸与迷迭香酸的方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种夏枯草或其革糖提取物中同时检测咖啡酸与迷迭香酸的方法,其特征在于包括如下步骤:利用薄层色谱法对夏枯草或其革糖提取物中咖啡酸与迷迭香酸同时进行定性鉴别;利用特定的极性溶剂提取法直接提取咖啡酸与迷迭香酸,再以咖啡酸与迷迭香酸混合对照品对照,用高效液相色谱法对夏枯草或其革糖提取物中的咖啡酸与迷迭香酸同时进行含量测定; 所述的薄层色谱法的具体步骤如下: 1供试品溶液的制备: 1夏枯草供试品溶液的制备: A、将夏枯草粉末加入甲醇水溶液中超声提取,过滤,得到的滤液除去溶剂,得到残渣; B、残渣用甲醇溶解,过滤,得到夏枯草供试品溶液; 2夏枯草革糖提取物供试品溶液的制备: A、取夏枯草革糖提取物,除去溶剂,得到残渣; B、残渣用甲醇溶解,过滤,得到夏枯草革糖提取物供试品溶液; 2对照品溶液的制备:用甲醇溶解咖啡酸和迷迭香酸对照品,得到咖啡酸和迷迭香酸混合溶液,作为对照品溶液; 3薄层色谱检测:吸取供试品溶液和对照品溶液分别点于同一高效硅胶GF254薄层板上,用展开剂展开,取出,晾干; 4观察硅胶GF254薄层板:分别置紫外光灯254nm与紫外光灯365nm下检识;观察供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上是否存在相同颜色的斑点,即可鉴定出夏枯草或其革糖提取物中是否含有咖啡酸与迷迭香酸成分; 步骤11A中所述的甲醇水溶液中甲醇的含量为体积百分比40~60%; 步骤11A中所述的甲醇水溶液的用量按2.0~4.0g夏枯草粉配比100~200mL甲醇水溶液计算; 步骤11A中所述的超声提取的条件为于功率50~200W、频率40~60kHz提取20~80分钟; 步骤11B中所述的甲醇的用量按2.0~4.0g夏枯草粉末配比2~4mL甲醇计算; 步骤12B中所述的甲醇的用量按相当于夏枯草药材量2.0-4.0g的夏枯草革糖提取物配比2~4mL甲醇计算; 步骤3中所述的展开剂为按体积比6.4~6.6:1.9~2.1:0.9~1.1:0.4~0.6混合得到的甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲酸溶液; 所述的高效液相色谱法的具体步骤如下: 1色谱条件:色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-甲醇-0.2%vv乙酸水溶液为流动相,检测波长为330nm;理论板数按咖啡酸与迷迭香酸峰计算应不低于10000; 2对照品溶液的制备:精密称定咖啡酸和迷迭香酸对照品,用甲醇水溶液溶解并定容,得到咖啡酸和迷迭香酸混合的对照品溶液; 3供试品溶液的制备: ①夏枯草供试品溶液的制备:取夏枯草粉末,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇水溶液,精密称重,超声处理,放冷,再称定重量,用甲醇水溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得夏枯草供试品溶液; ②夏枯草革糖提取物供试品溶液的制备:取夏枯草革糖提取物,精密量取,先用甲醇调整至所得溶液与甲醇水溶液的浓度相同;再加入甲醇水溶液至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,得夏枯草革糖提取物供试品溶液; 4测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪,测定,即得; 步骤1中所述的流动相为乙腈、甲醇和0.2%vv乙酸水溶液按体积比14-16:11-13:72-74配比得到; 步骤1中所述的色谱中的色谱柱为UltimateXB-C18色谱柱; 步骤1中所述的色谱中的柱温为24-27℃; 步骤1中所述的流动相的流速为0.8-1.2mLmin; 步骤2中所述的甲醇水溶液是浓度为体积百分比45-55%的甲醇水溶液; 步骤2中所述的对照品溶液中每lmL含0.005-0.006mg咖啡酸、0.05-0.06mg迷迭香酸; 步骤3①中所述的夏枯草粉通过如下步骤得到:将夏枯草粉碎,过至少40目筛,得到夏枯草粉; 步骤3①中所述的甲醇水溶液是浓度为体积百分比45-55%的甲醇水溶液; 步骤3①中所述的甲醇水溶液的用量按每1.0-3.0g夏枯草粉配比100-300mL甲醇水溶液计算; 步骤3①中所述的超声的条件为功率500-700W、频率30-50kHz处理40-80分钟; 步骤3②中所述的甲醇水溶液是浓度为体积百分比45-55%的甲醇水溶液; 步骤3②中所述的夏枯草革糖提取物供试品溶液的浓度按夏枯草药材计为1.4-1.6g100mL; 步骤4中所述的对照品溶液的吸取体积和所述的供试品溶液的吸取体积按体积比1:1配比。
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