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清源创新实验室范立海获国家专利权

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龙图腾网获悉清源创新实验室申请的专利一种大肠杆菌利用营养型甜味剂-蔗糖高效合成D-阿洛酮糖的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118995850B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411065239.7,技术领域涉及:C12P19/02;该发明授权一种大肠杆菌利用营养型甜味剂-蔗糖高效合成D-阿洛酮糖的方法是由范立海;郑灵洁;郭强设计研发完成,并于2024-08-05向国家知识产权局提交的专利申请。

一种大肠杆菌利用营养型甜味剂-蔗糖高效合成D-阿洛酮糖的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及代谢工程领域,提供一种大肠杆菌利用营养型甜味剂‑蔗糖高效合成D‑阿洛酮糖的方法,通过重组大肠杆菌利用廉价传统的营养型甜味剂生产D‑阿洛酮糖,利用大肠杆菌JM109DE3为底盘宿主,通过在野生型大肠杆菌中引入外源蛋白蔗糖‑6‑磷酸水解酶CscA、蔗糖渗透酶CscB、果糖激酶CscK、D‑阿洛酮糖‑6‑磷酸差向异构酶AlsE和D‑阿洛酮糖‑6‑磷酸磷酸酶A6PP实现共同表达,构建了一条从蔗糖生产D‑阿洛糖的路径。通过引入ptsG‑F和敲除ptsG、fruA、ptsI和ptsH来重新规划糖跨膜转运途径,从而提高了底物利用率。

本发明授权一种大肠杆菌利用营养型甜味剂-蔗糖高效合成D-阿洛酮糖的方法在权利要求书中公布了:1.一种大肠杆菌利用营养型甜味剂-蔗糖高效合成D-阿洛酮糖的方法,其特征在于:以大肠杆菌JM109DE3为底盘宿主,通过引入外源基因蔗糖-6-磷酸水解酶cscA、蔗糖渗透酶cscB、果糖激酶cscK、D-阿洛酮糖-6-磷酸差向异构酶alsE和D-阿洛酮糖-6-磷酸磷酸酶a6PP,初步构建D-阿洛酮糖的合成途径;通过引入ptsG-F和敲除ptsGfruAptsIptsH来重新编码蔗糖水解产生的D-葡萄糖和D-果糖的运输途径,实现蔗糖水解产物的共利用;通过pfkAzwf的敲除来调节Embden-Meyerhof-ParnasEMP途径和磷酸戊糖PP途径的碳通量,强化D-阿洛酮糖的合成路径;最终获得的重组菌株E.coliΔPtsG,ΔFruA,ΔPtsI,ΔPtsH,ΔPfkA,ΔZwf,CscA,CscB,CscK,AlsE,A6PP,PtsG-F通过放大培养,优化细胞生长,成功构建了以蔗糖为底物高效合成D-阿洛酮糖的细胞工厂;其中cscAcscBcscK均来源于大肠杆菌W菌株,氨基酸序列分别如SEQIDNO1、SEQIDNO2、SEQIDNO3所示;alsE来自大肠杆菌K12菌株,氨基酸序列如SEQIDNO4所示;a6PP来自脆弱拟杆菌BacteroidesfragilisNCTC9343,氨基酸序列如SEQIDNO5所示;ptsGfruAptsIptsHpfkAzwf的氨基酸序列分别如SEQIDNO6、7、8、9、10、11所示;外源蛋白ptsG-F,来源于大肠杆菌菌株K12中ptsG的突变体,其第12个氨基酸缬氨酸被苯丙氨酸取代,ptsG-F氨基酸序列如SEQIDNO12所示。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人清源创新实验室,其通讯地址为:362100 福建省泉州市泉港区前黄镇学院路1号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。

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