复旦大学附属中山医院朱同玉获国家专利权
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龙图腾网获悉复旦大学附属中山医院申请的专利一种多能干细胞诱导分化中期细胞的冻存和复苏方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120982501B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202511198145.1，技术领域涉及：A01N1/126；该发明授权一种多能干细胞诱导分化中期细胞的冻存和复苏方法及应用是由朱同玉;张伟韬;王继纳;颜笑天;许明设计研发完成，并于2025-08-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种多能干细胞诱导分化中期细胞的冻存和复苏方法及应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种多能干细胞诱导分化中期细胞的冻存和复苏方法及应用，冻存方法包括如下步骤：1起始细胞为多能干细胞，经诱导分化至中期阶段；2使用温和消化酶回收细胞并计数，将细胞重悬于冻存液中；3程序降温至‑80℃后转入液氮保存，备用。本发明提供的冻存方法和冻存液显著提高了分化中期细胞的冻存存活率，避免了传统冻存液诱导的凋亡或不可逆应激损伤，相比现有技术中使用通用冻存液导致的细胞损伤大、存活率低的问题有明显改善。复苏后的细胞分化潜能保持良好，能顺利形成成熟肾单位结构，解决了现有技术中后续分化失败的问题。
本发明授权一种多能干细胞诱导分化中期细胞的冻存和复苏方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种多能干细胞诱导分化的中期细胞的冻存和复苏方法，其特征在于，包括如下步骤： 1起始细胞为多能干细胞，经诱导分化至中期阶段； 2使用温和消化酶回收细胞并计数，将细胞重悬于冻存液中； 3程序降温至-80℃后转入液氮保存，备用； 4待需要复苏细胞时，将冻存的细胞从液氮中取出，迅速投入37℃水浴中，在1～2min内使冻存液完全融化； 5融化后的细胞中加入DMEM培养液缓慢稀释，然后离心去除DMSO； 6将细胞接种于悬浮培养系统继续完成肾脏类器官诱导分化； 在步骤2中，所述冻存液包括如下组分：APEL培养液，KOSR血清替代物，二甲基亚砜，成纤维细胞生长因子FGF9； 按体积百分比计，在冻存液中APEL培养液占50~70%，KOSR血清替代物占20~30%，二甲基亚砜占5~10%，FGF9因子在冻存液中的终浓度为20~30ngmL，各组分含量之和为100%。
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