北京医院张烜获国家专利权
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龙图腾网获悉北京医院申请的专利一种同时鉴定细胞亚群及相关因子磷酸化水平的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120594847B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510835319.4,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权一种同时鉴定细胞亚群及相关因子磷酸化水平的方法是由张烜;刘玮;秦佳欢设计研发完成,并于2025-06-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种同时鉴定细胞亚群及相关因子磷酸化水平的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种同时鉴定细胞亚群及相关因子磷酸化水平的方法。本申请简化了蛋白磷酸化流式细胞染色步骤,而不影响染色效果,能够同时检测17种染色的细胞,另外,同时节约了成本,更加高效。本申请提供的方法能够提供更精确的区分能力,能够从少细胞标本中获取更多的信息,能够在低水平检测到异常细胞,增加实验室效率,尤其适合免疫系统的研究,具有广阔的前景。
本发明授权一种同时鉴定细胞亚群及相关因子磷酸化水平的方法在权利要求书中公布了:1.一种同时鉴定样本中细胞亚群及其相关因子磷酸化水平的方法,其特征在于,所述方法包括:使用第一抗体混合物鉴定细胞亚群,然后使用第二抗体混合物检测相关因子磷酸化水平,所述第一抗体混合物由能特异性识别细胞表面标志物的抗体组成,所述细胞表面标志物为CD183、TCRαβ、CD8a、CD127、CD45RA、CD279、CCR6、CD185、CD25、CD4和CD197,所述第二抗体混合物由能特异性识别相关因子磷酸化位点的抗体组成,所述相关因子为STAT1、STAT3、STAT4、STAT5和STAT6; 所述第一抗体混合物中的抗体偶联荧光染料,所述荧光染料由BUV496、BUV395、BUV737、BV510、BV605、BV650、BV711、PE、PEDazzle594、PECy5、AlexaFluor700和APC-Cy7组成; 所述第二抗体混合物中的抗体偶联荧光染料,所述荧光染料由AF488、BV421、APC、PECy7和PerCP-Cy5.5组成; 所述细胞为T淋巴细胞,所述样本为PBMC; 使用第一抗体混合物鉴定细胞亚群还包括染色前固定细胞; 使用BDphosflowFixBufferI固定细胞; 所述方法还包括固定细胞前使用白细胞介素孵育细胞; 所述白细胞介素为人白细胞介素; 所述人白细胞介素包括IL-2、IL-6和IL-12; IL-2、IL-6和IL-12的浓度比例为20:4:1; 所述方法还包括固定细胞后穿透细胞生物膜; 所述穿透细胞生物膜的方法为离心沉淀后重悬并清洗细胞; 使用BDphosflowPermBufferIII重悬细胞; 所述方法还包括使用流式细胞仪分析处理好的样本。
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