浙江大学夏旸获国家专利权
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龙图腾网获悉浙江大学申请的专利基于单细胞免疫图谱的肺结节良恶性鉴别诊断模型的构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119044493B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411096852.5,技术领域涉及:G16H50/20;该发明授权基于单细胞免疫图谱的肺结节良恶性鉴别诊断模型的构建方法是由夏旸;李雯;尹巍巍;石宏宇;陈伟设计研发完成,并于2024-08-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于单细胞免疫图谱的肺结节良恶性鉴别诊断模型的构建方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种基于单细胞免疫图谱的肺结节良恶性鉴别诊断模型的构建方法。该方法利用外周血样获得PBMC,并对PBMC进行质谱流式分析,获得质谱流式分析数据集;采用PARC聚类算法,根据标记表达将细胞划分为不同的表型,利用每个细胞亚组的表达比例作为建模特征,得到肺结节良恶性鉴别诊断模型,实现了肺癌的筛查和早期诊断。该技术具有非侵入性和高灵敏度、高特异性的特点,提高了肺癌筛查的诊断准确性,并为患者提供了更早的治疗机会和更合适的手术方式。
本发明授权基于单细胞免疫图谱的肺结节良恶性鉴别诊断模型的构建方法在权利要求书中公布了:1.一种基于单细胞免疫图谱的肺结节良恶性鉴别诊断模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:用Ficoll分离法处理外周血样获得外周血单个核细胞,并对外周血单个核细胞进行质谱流式分析,获得质谱流式分析数据集;采用PARC聚类算法,根据标记表达将细胞划分为不同的表型,利用每个细胞亚组的表达比例作为建模特征,得到肺结节良恶性鉴别诊断模型; 具体通过以下步骤实现: 1用Ficoll分离法处理外周血样获得外周血单个核细胞,将它们悬浮在5ml预冷的流式细胞分选缓冲液中,然后在4℃下400×g离心5min丢弃上清液,并重悬细胞沉淀物缓冲液,在CyTOF质谱流式细胞技术检测前进行外周血单个核细胞的细胞计数和质量评估,以确保计数大于3×106,存活率大于85%; 2选择40种金属偶联抗体作为标记细胞的标记物;PBMCs用PBS缓冲液洗涤,然后用0.5mM顺铂染色,用Fc受体阻断细胞与抗体结合30min,通过离心去除未结合的抗体,然后将PBMC固定在200µL的插入溶液中过夜,细胞在蒸馏水中洗涤和重悬,加入20%EQ磁珠中,并在质谱流式细胞仪上进一步分析; 3采用PARC聚类算法,根据标记表达将细胞划分为不同的表型,利用每个细胞亚组的表达比例作为建模特征,使用随机森林算法及10倍交叉验证筛选特征;采用训练集和验证集,将样本按入组的时间顺序分为训练集和验证集;筛选出34个免疫细胞亚群和标记物作为建模特征,肺结节良恶性鉴别诊断模型的19的特征包括:CD33-CD14-CD3+CD4+CD28+,CD33-CD14-CD3+CD4+CD274+,CD33-CD14-CD3+CD4+CD197+CD45RA-,CD33-CD14-CD3+CD4+HLA_DR+CD38+,CD33-CD14-CD3+CD4+CXCR5-CD183-CCR6-,CD33-CD14-CD3+CD4+CD25+CD127-CD161-CD45RA+,CD33-CD14-CD3+CD8+CD197+-CD45RA+,CD33-CD14-CD3-CD19+CD24+CD38+,CD33-CD14-CD3-CD20-CD38+CD27+,CD33-CD14-CD3-CD56+CD16+CD94+,CD33-CD14-CD3-CD56+CD16+CD161+,CD3-CD19-CD56-CD14-CD123+CD11c+,CD33-CD14-CD3-CD56+CD16-,CD86,CD11c,CD183,CD94,CD4,CD11b; 肺癌浸润程度判断模型的15个特征包括:CD33-CD14-CD3+CD8+CD85j+,CD33-CD14-CD3+CD8+CD161-,CD33-CD14-CD3+CD4+,CD33-CD14-CD3+CD4+CD197-CD45RA+,CD33-CD14-CD3+CD4+HLA_DR+CD38+,CD33-CD14-CD3+CD4+HLA_DR+CD38-,CD33-CD14-CD3+CD8+,CD33-CD14-CD3+CXCR5+,CD33-CD14-CD3+CD8+CD197+CD45RA-,CD33-CD14-CD3-CD19+CD24+CD38+,CD33-CD14-CD3-CD56+CD16+,CD33-CD14-CD3-CD56+CD16+CD57+,CD33-CD14-CD3-CD56+CD16+HLA_DR+,CD3-CD19-CD56-CD14-HLA_DR-,CD56; 4通过随机森林法建模,得到肺结节良恶性鉴别诊断模型及恶性肺结节的浸润程度判断模型。
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