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龙图腾网获悉泸州品创科技有限公司申请的专利小麦干种子半薄切片制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119666499B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-01发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411696486.7，技术领域涉及：G01N1/28；该发明授权小麦干种子半薄切片制备方法是由郭晓江;李令;李惠根;李哲;李阳;王松涛;陈倩;沈才洪;王际睿设计研发完成，并于2024-11-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本小麦干种子半薄切片制备方法在说明书摘要公布了：本发明公开了小麦干种子半薄切片制备方法，包括预固定、固定、二次固定、漂洗、脱水、树脂渗透、包埋、聚合、修块、切片、展片、染色观察。本方法的优点在于预固定使干种子软化，不影响干种子细胞原有形态；双重固定使得干种子中气体外排干净，细胞固定效果更好，切片完整；延长梯度乙醇和梯度树脂置换时间，能够保证最终树脂充分浸透细胞间隙，从而使切片完整、平整。本方法针对小麦干种子硬、充满淀粉的特征，逐步解决常规方法制作干种子半薄切片遇到的树脂浸透不完全、切片破碎、切片皱缩等问题，得到完整的、组织结构清晰的小麦干种子半薄切片，可进一步进行不同部位细胞形态观察以及定量分析，从而为小麦干种子结构研究提供技术支持。

本发明授权小麦干种子半薄切片制备方法在权利要求书中公布了：1.小麦干种子半薄切片制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 1预固定：将小麦干种子完全置于4％多聚甲醛固定液中，抽真空20-30min，缓慢放气，更换4％多聚甲醛固定液，固定10-12h，使种子软化； 2固定：将1中软化的种子中部横切厚度为2-3mm的薄片样本，置于4％多聚甲醛固定液中抽真空4-6h，更换4％多聚甲醛固定液4℃固定12h； 3二次固定：将2中的固定液更换为FAA，抽真空20-30min，更换FAA固定液4℃固定12h； 4漂洗：用0.1MPB缓冲液漂洗三次3中固定好的样本，去除固定液； 5脱水：用20％、40％、60％、70％、80％、90％梯度乙醇对4中漂洗后的样本进行脱水，每次50min，最后用100％乙醇脱水3次，每次1h； 6树脂渗透：用无水乙醇配制的25％、50％、75％梯度LRwhiteresin树脂浸透5中脱水后的样本，每次4h，最后用100％LRwhiteresin树脂浸透3次，每次15h； 7包埋：将6中树脂充分浸透的样本放在0.5mL离心管管盖上，切面朝下，进行包埋； 8聚合：将7中包埋了样本的离心管倒置于65℃烘箱烘干10-12h，进行聚合； 9修块：将8中样本使用超薄切片机设置速度8-10，切片厚度2-4μm参数进行修块，去除多余树脂，露出完整样本； 10切片：使用超薄切片机设置速度1，切片厚度1-2μm参数对9中修块后的样本切片，使完整切片落入水槽中； 11展片：在载玻片上滴水，将10中完整的切片捞出，放在载玻片上的水滴中，烤片，蒸干水分； 12染色观察：使用0.1％甲苯胺蓝溶液将11中切片染色5-10min后，流水冲洗1-5min，烤片烘干，蒸干水分，显微镜镜检，封片观察； 步骤11中40-60℃烤片5-10min，蒸干水分； 步骤12中染色冲洗后40-60℃烤片烘干水分。

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