北京医院张瑞获国家专利权
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龙图腾网获悉北京医院申请的专利一种基于CRISPR和纳米抗体的活细胞核酸成像系统、方法和用途获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120424997B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-05-01发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510459296.1，技术领域涉及：C12N15/85；该发明授权一种基于CRISPR和纳米抗体的活细胞核酸成像系统、方法和用途是由张瑞;冯蕾;韩彦熙;黄滔;李金明;田梦设计研发完成，并于2025-04-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于CRISPR和纳米抗体的活细胞核酸成像系统、方法和用途在说明书摘要公布了：本发明属于活细胞成像技术领域，公开一种基于CRISPR和纳米抗体的活细胞核酸成像系统、方法和用途，该系统包括：改造的dCas9蛋白表达载体，含有n个ALFA多肽标签；改造的sgRNA表达载体，包含特异性引导序列；荧光纳米抗体表达载体，含有双价或三价荧光纳米抗体编码序列，以可操作的方式连接，其中荧光蛋白作为内部标签插入纳米抗体分裂位点之间，可与dCas9蛋白携带的ALFA多肽标签结合并稳定发光，而游离状态的荧光纳米抗体则会发生自降解从而不发出荧光。本发明能够以单分子分辨率和高信噪比可视化单拷贝核酸序列，尤其是活细胞中单拷贝核酸序列的成像标记。
本发明授权一种基于CRISPR和纳米抗体的活细胞核酸成像系统、方法和用途在权利要求书中公布了：1.一种基于CRISPR和纳米抗体的活细胞NDA成像系统，其特征在于，包括改造的dCas9蛋白表达载体、改造的sgRNA表达载体及荧光纳米抗体表达载体； 其中，改造的dCas9蛋白表达载体包含dCas9和n个串联ALFA多肽标签，n=1,4,8,16,24，且可与相应纳米抗体结合； 改造的sgRNA表达载体包含与dCas9蛋白配对使用、针对检测靶序列的特异性引导序列，所述改造的dCas9蛋白在改造的sgRNA引导下结合至靶核酸； 双价或三价荧光纳米抗体表达载体中的纳米抗体的抗原互补决定区可识别改造的dCas9蛋白表达载体中的串联ALFA多肽标签，且荧光蛋白作为内部标签插入纳米抗体分裂位点之间，所述荧光纳米抗体能够与改造后的dCas9蛋白交替结合形成多层级联复合物，从而实现级联信号放大反应。
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