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  • 本发明公开了一种悬浮培养细胞单克隆筛选培养方法,该方法包括以下步骤选择悬浮培养条件的细胞并诱导细胞恢复贴壁性;将发育成明显克隆的单个细胞进行分离,并对剩余细胞进行放射线照射,使剩余的细胞失去增殖能力,成为饲养层细胞;对分离出的单克隆进行培养...
  • 本发明提供一种外囊泡靶向工程化改造方法,属于外囊泡技术领域,该方法首先通过差速离心提取外囊泡,经粒度分析和表面电位测定进行预筛查,然后采用表面活化剂处理,通过配位基团修饰剂和靶向配体分子进行表面修饰,利用表面修饰评估方程组计算修饰密度比,测...
  • 本发明公开一种天然来源多糖水凝胶及其制备方法和应用。所述天然来源多糖水凝胶由包含乳糖改性的壳聚糖以及3‑氨基苯硼酸改性的透明质酸钠的原料经混合均匀后得到。所述天然来源多糖水凝胶可以模拟细胞外基质的作用,充当细胞的三维培养环境,有利于维持细胞...
  • 本发明提供来源于水稻的外泌体及其制备方法与应用,所述外泌体具有双层膜球型结构,粒径范围为20~1000nm。该外泌体是通过水稻愈伤组织获得,同时具备高生物安全性、稳定性、可持续量产的特点。并且经试验证实,该外泌体具有抗老化、促进细胞再生与组...
  • 本发明适用于生物技术领域,提供了一种二糖及复合酶快速提取植物根茎细胞外囊泡的方法。本发明首创“酶解‑二糖溶液浸提耦合”法提取植物细胞外囊泡,解决了提取方法单一的弊端。本方法条件温和,保持囊泡结构的原发性、完整性以及生物活性,且提取纯度较高,...
  • 本发明涉及一种视网膜神经血管单元体外三培养模型及其制备方法,属于生物技术领域。本发明提供了一种视网膜神经血管单元体外三培养模型,所述体外三培养模型由视网膜微血管内皮细胞、视网膜神经节细胞和视网膜Müller细胞经体外Transwell间接共...
  • 本发明公开了一种高仿生在体免疫微环境的离体皮肤模型及应用,属于生物医药技术领域。本发明的高仿生在体免疫微环境的离体皮肤模型,制备步骤包括:先在六孔板下层加入培养基,再加入小鼠骨髓细胞悬液,然后放入Transwell小室,将分离好的小鼠皮肤平...
  • 本发明公开了一种用于诱导多能干细胞分化为胰岛素分泌细胞的培养基组合及其应用,属于细胞分化技术领域。该培养基组合包括诱导培养基1和诱导培养基2,其中:所述诱导培养基1包括80‑90vol% DMEM高糖培养基、10‑20vol%FBS、1.5...
  • 本发明公开了一种诱导宫血间充质干细胞分化为毛囊源性黑色素细胞的方法,其核心在于通过模拟毛囊微环境条件,采用两阶段诱导策略实现定向分化:第一阶段诱导宫血间充质干细胞分化为毛囊黑素干细胞,第二阶段进一步诱导毛囊黑素干细胞分化为毛囊源性黑色素细胞...
  • 本发明提供一种多能干细胞衍生肾脏类器官的诱导分化方法,通过五个关键阶段实现:首先将多能干细胞接种于基质胶包被的24孔板中,使细胞形成密度合适的单个细胞贴壁状态;随后在Day 0‑4阶段添加WNT激动剂和Noggin因子诱导原始条纹分化;在D...
  • 本发明提供了一种烟雾病模型及其构建方法与应用,属于烟雾病模型构建技术领域。本发明提供的构建烟雾病模型的方法,包括如下步骤:提取烟雾病患者外周血中的CD34+造血祖细胞,经重编程生成hiPSC,并进一步分化为脑类器官和血管类器官,然后将脑类器...
  • 本发明涉及生物医学领域,特别涉及一种含母源因子的全能干细胞培养液。本发明首次将母源因子联合石榴籽活性肽提取物共同用于制备全能干细胞培养液,所述培养液中母源因子是选自TPRX1、TPRXL、miR‑302和 IL1α组合,经验证分析,上述联合...
  • 本发明涉及一种人类单倍体类囊胚的构建方法,首先分选单倍体细胞,将其置于人类类囊胚诱导体系中,可产生具有单倍体属性的人类单倍体囊胚样结构,即为人类单倍体类囊胚;构建得到的人类单倍体类囊胚具有与人类囊胚相似的结构和细胞组成,在不同细胞诱导培养液...
  • 本发明名称为一种胚胎培养液及其制备方法和应用,属于辅助生殖技术领域。所要解决的技术问题为降低细胞培养液使用过程中铵离子浓度。技术方案要点为所述胚胎培养液包括:氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钾、氯化钙、硫酸镁、碳酸氢钠、乳酸钠溶液、丙酮酸钠、葡萄糖...
  • 本发明公开了一种高效率的C57BL/6小鼠体外受精的方法,涉及生物技术领域的体外受精方法的使用,特别是在小动物基因编辑模型构建的体外受精过程中能获取更多较高质量的受精卵,用于基因编辑。从而大大降低基因编辑的动物成本,促进其广泛应用。
  • 本发明公开了一种体外获取动物胚胎活检组织的方法,涉及辅助生殖及家畜育种技术领域。本发明要解决的技术问题是动物胚胎活检过程中细胞计量困难。为解决该技术问题,本发明提供了体外获取动物胚胎活检组织的方法,包括使用面积测量工具测定待活检的动物胚胎的...
  • 本发明公开了提高牛体外胚胎发育率的条件培养液的制备方法与应用。本制备方法使用含10%FBS的DMEM/F12细胞培养液将永生化牛子宫内膜上皮细胞进行培养,在培养过程中收集细胞培养液,过滤后得到永生化牛子宫内膜上皮细胞条件培养液,即为可以提高...
  • 本发明公开了一种外泌体及其制备方法与应用,涉及外泌体技术领域。包括以下步骤:(1)将人肺干细胞正常培养在无血清的培养体系中,收集细胞培养上清;(2)将收集的培养上清进行差速离心去除细胞碎片,培养上清与外泌体提取试剂按照4 : 1的比例进行混...
  • 本发明公开了负载黄芩苷的外泌体,所述外泌体来源于内皮祖细胞,每1mg/mL所述外泌体的溶液包封0.5‑1 mg/mL黄芩苷的溶液。本发明还公开了负载黄芩苷的外泌体的制备方法和应用。本发明的有益效果主要包括:本发明首次证实了BA在治疗急性肺损...
  • 本发明属于干细胞技术与再生医学领域,具体涉及一种毛囊干细胞的制备方法,其包括从尿液细胞制备诱导多能干细胞,将诱导多能干细胞在表皮诱导培养基中培养,得到表皮祖细胞,然后将表皮祖细胞在毛囊干细胞诱导培养基中培养,得到毛囊干细胞。本发明通过对诱导...
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