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  • 本申请公开了广东小耳花猪精原干细胞体外培养体系构建及表面标记物筛选,属于细胞培养技术领域,其技术方案:先破碎睾丸,随后酶消化、密度梯度离心纯化、差速贴壁纯化,得到纯化后的精原干细胞;随后将得到的精原干细胞接种至饲养层细胞并于培养基中培养;所...
  • 本申请公开了一种峨眉髭蟾卵巢细胞系的构建方法及应用。该方法包括:选取变态期幼体卵巢组织,经消毒、获取后,使用胶原酶I消化液于26℃消化1小时;组织块贴壁后,使用低渗透压完全培养基在25‑27℃进行原代培养,所述培养基为含10%‑15%胎牛血...
  • 本发明公开了一种小肠类器官和肝脏类器官共培养体系的构建方法,涉及生物组织工程领域,包括以下步骤:在细胞小室嵌套上室与细胞小室嵌套下室之间的聚碳酸酯膜上均匀铺展一层基质胶,凝固,形成隔离层;将刚传代的小鼠小肠类器官用基质胶包被,接种于细胞小室...
  • 本发明属于生物技术领域,具体提供了一种水牛乳源外泌体的制备方法及其产品和在改善肠道健康方面的应用,制备方法,包括以下步骤:(1)多重离心去除杂质,加入CaCl2去除酪蛋白;(2)高速离心及滤膜过滤,进行初步纯化;(3)蔗糖密度梯度离心以完成...
  • 本发明公开了一种吸入病原微生物气溶胶导致呼吸道感染模型的构建方法,包括以下步骤:将呼吸道细胞接种于Transwell小室上室,培养至形成完整细胞屏障后,将载有细胞的小室转移至暴露腔;将病原微生物悬液雾化为气溶胶,并实时调控其环境参数;将气溶...
  • 本发明公开了一种提高雪莲细胞培养物生物量及黄酮含量的方法,包括,取黄白色雪莲愈伤组织在培养基上培养,温度为24℃,16 h/d光照,15天继代一次,继代三次获得生长旺盛、结构紧凑的黄白色或黄绿色愈伤组织;其中,培养基的制备方法包括,称取MS...
  • 本发明公开了一种石菖蒲来源外泌体样纳米囊泡及其制备方法与应用。本发明的石菖蒲来源外泌体样纳米囊泡内含丰富的生物活性成分,具有优异的生物相容性、脑靶向性和跨生物屏障特性,有利于增强脑部疾病的治疗效果。本发明的石菖蒲来源外泌体样纳米囊泡经口服或...
  • 本发明涉及细胞工程与发酵工程技术领域,公开了一种基于代谢调控的细胞培养基质改良工艺,包括:建立初始培养稳态,使离子敏感型水凝胶微载体处于压缩致密状态;监测乳酸累积浓度,当其超过配位置换阈值时,利用乳酸作为竞争性配体置换原位金属交联点,诱导微...
  • 本发明公开了一种基于DNA标记的融合细胞膜的制备方法与应用,属于生物医药技术领域。本发明构建了包含目标膜蛋白编码序列的DNA标记模块1,将其与工程化修饰的活细胞共同孵育,通过点击化学反应将DNA标记模块特异性偶联至细胞膜表面的膜蛋白上,获得...
  • 本发明属于生物技术领域,特别涉及一种丝氨酸在缓解糙皮侧耳热胁迫中的应用和方法。热胁迫条件下外源丝氨酸供应促进糙皮侧耳菌丝恢复生长,提高抗氧化酶活性、子实体的产量和营养物质产量;PHGDH酶活性受到抑制时,丝氨酸合成减少;过表达phgdh能够...
  • 本发明涉及微生物发酵技术领域。本发明提供了忧遁草叶粉末在制备提高灵芝胞外多糖产量及抗氧化活性的发酵培养基中的应用,以及利用所述发酵培养基提高灵芝胞外多糖产量及抗氧化活性的方法。本发明中通过在灵芝液体发酵培养基中添加特定浓度的忧遁草叶粉末,协...
  • 本发明公开了分段调控硫循环强化脱氮微生物群落构建方法,属于环境生物技术领域,该方法包括三个阶段:第一阶段低碳氮比驯化培养,碳氮比1.5‑2.5 : 1,驯化50‑70天;第二阶段电子供体受体比调控培养,/摩尔比4‑6 : 1,培养15‑25...
  • 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种靶向树突状细胞的表达产气荚膜梭菌多抗原的重组乳杆菌及其构建方法与应用。所述重组乳杆菌含有表达融合基因的表达载体;所述融合基因包含编码表达PgsA'‑fimA融合蛋白、LysM‑Fba融合蛋白、LP12...
  • 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种生产α‑酮戊二酸的重组大肠杆菌工程菌株及其构建方法和应用。本发明工程菌株A09在完全不添加Triton X‑100等任何破膜剂的条件下,即可实现对高浓度L‑谷氨酸钠的高效催化。在长达6 h的高强度催化过程...
  • 本发明公开了一种生产丁二胺的基因工程菌及其制备方法与应用,属于生物工程领域。本发明获得了一个最适pH上调的精氨酸脱羧酶突变体AdiAD494K/H729D。该突变体AdiAD494K/H729D在pH 7.0时的比酶活达到野生型的9.3倍,...
  • 本发明公开了一种高效生产丁二胺的基因工程菌及其应用,属于生物工程领域。本发明双界面协同改造的最优突变体AdiAD606R/H730D在pH 7.0‑9.0整个中碱性范围内均保持较高活性。本发明所得的精氨酸脱羧酶突变体的最适pH上调,且中性p...
  • 本发明公开了一株酪醇耐受型大肠杆菌及其在红景天苷生物合成中的应用,属于基因工程技术领域。本发明获得的5A02菌株可耐受 40 mM 酪醇浓度,相较于出发菌株 5A具有高酪醇耐受性。本发明获得的5A02/pkk223‑3‑ugt85a1菌株能...
  • 本发明涉及生物技术领域,具体公开一株基因工程重组大肠杆菌(Escherichia coli)及其在生产红景天苷和酪醇中的应用。所述重组大肠杆菌是通过在L‑酪氨酸生产菌株细胞内过表达外源酮酸脱羧酶、糖基转移酶,以及内源UDP‑葡萄糖合成途径关...
  • 本发明公开了一种戊二胺耐受的谷氨酸棒状杆菌突变株及其突变位点应用,属于微生物代谢工程领域。本发明筛选并鉴定了影响谷氨酸棒状杆菌对戊二胺耐受能力有显著影响的基因,并构建了一系列的基因突变菌株。本发明构建的突变菌株在摇瓶发酵条件下,对戊二胺的耐...
  • 本发明公开了一种高效从头合成1, 5‑戊二胺的谷氨酸棒杆菌的构建方法,属于生物化工技术领域。本发明以产赖氨酸的谷氨酸棒杆菌CGlys为出发菌株,通过优化密码子并以最佳启动子Psod控制表达,获得了重组谷氨酸棒杆菌;利用此重组菌株进行发酵法合...
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