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小分子化合物PJ34在提高先导编辑效率中的应用
本发明公开了小分子化合物PJ34在提高先导编辑效率中的应用,通过添加PJ34即可增强先导编辑效率,该方法操作简便,不需要对先导编辑器蛋白或pegRNA进行改造,也无需通过大量预实验测试不同的pegRNA序列。此外,PJ34易于合成、价格低廉...
一种构建MSTN基因敲除的猪原代细胞方法
本发明公开了一种构建MSTN基因敲除的猪原代细胞方法,其利用高效简便的基因修饰技术TALEN技术,设计构建能高效敲除MSTN基因的质粒;通过对猪MSTN基因设计基因编辑靶位点,该靶位点均能被Cas9核酸内切酶特异性识别,从而介导双链断裂,在...
一种共表达人源抗菌肽和人源干扰素的重组质粒及其在提升观赏鱼抗病能力方面的应用
本发明属于动物基因工程和生物育种技术领域,具体涉及一种共表达人源抗菌肽和人源干扰素的重组质粒及其在提升观赏鱼抗病能力方面的应用。所述重组质粒为含有人源抗菌肽基因hLL‑37和人源干扰素基因hIFNA1的带有Tol2转座子、金鱼泛表达启动子g...
一种mRNA表达载体及其应用
本发明提供了一种mRNA表达载体及其应用,本发明属于mRNA疫苗技术领域。本发明提供的三组mRNA表达载体的5’UTR来自α‑珠蛋白或人类β‑珠蛋白,3’UTR来自人类16号染色体的alpha 1或β‑珠蛋白。将我国流行株诺如病毒GII.4...
一种中华蜜蜂DnaJC28基因及其编码蛋白和应用
本发明公开了一种中华蜜蜂DnaJC28基因及其编码蛋白和应用,属于细胞生物学和分子生物学技术领域。本发明首次研究发现中华蜜蜂DnaJC28定位在细胞质。短期热胁迫和长期热胁迫均可诱导中华蜜蜂DnaJC28的表达,沉默DnaJC28能够降低中...
在肝细胞中进行高效定点基因敲入的方法及其应用
本发明提供了一种在肝细胞中进行高效定点基因敲入的方法及其应用。本发明提出了以增殖人类肝细胞(Proliferated Human Hepatocyte, ProliHHs)作为靶细胞进行基因敲入操作的技术方案。通过系统的优化策略,经过基因编...
一种TGF-β激活型CAR-NK细胞的制备及应用
本发明属于肿瘤细胞免疫治疗技术领域,具体涉及一种TGF‑β激活型CAR‑NK细胞的制备及应用。本发明所述制备方法,包括慢病毒表达质粒的构建、转化、筛选、病毒包装及病毒颗粒制备、感染细胞、细胞扩增等步骤。本发明构建的CD276CAR.TGFB...
一种不孕小鼠动物模型的构建方法和应用
本发明属于分子生物技术领域,公开了一种不孕小鼠动物模型的构建方法和应用。本发明通过条件性敲除子宫内膜细胞Nat10基因,构建不孕的小鼠模型,该小鼠模型具有胚胎着床失败、子宫蜕膜化受损等表型,与人类复发性流产的症状及病理过程相符,操作可控性好...
一种高效敲除异源八倍体长丰鲫runx2b基因的方法及应用
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种高效敲除异源八倍体长丰鲫runx2b基因的方法及应用。本发明针对长丰鲫中异育银鲫和兴国红鲤两套亲本来源的runx2b全部等位基因,设计了gRNA‑1和gRNA‑2;将体外转录合成的两个gRNA与Cas9蛋...
一种激活ζ-珠蛋白基因表达的方法和组合物
本发明公开了一种激活ζ‑珠蛋白基因表达的方法和组合物。所述方法包括使用CRISPR‑Cas9系统通过同源重组修复在ζ‑珠蛋白基因的启动子区的DNA正义链或反义链人工形成包含NTG‑N(7‑8)–WGATAR序列或NAG‑N(7‑8)–WGA...
一种激活ζ-珠蛋白基因表达的方法和组合物
本发明公开了一种激活ζ‑珠蛋白基因表达的方法和组合物。所述方法包括使用基因编辑技术在ζ‑珠蛋白基因的非编码区的正义链或反义链人工形成包含NTG‑N(7‑8)‑WGATAR序列、NAG‑N(7‑8)‑WGATAR序列、YTATCW‑N(7‑8...
一种L-精氨酸-α-酮戊二酸的酶法合成工艺及其设备
本发明涉及精酮生产技术领域,具体地说,涉及一种L‑精氨酸‑α‑酮戊二酸的酶法合成工艺及其设备。该工艺包括如下步骤:S1、将谷氨酸氧化酶基因定向转入目的菌种中,得到酶菌体,并对酶菌体进行发酵培养;S2、将所得发酵液通过管式离心机进行固液分离,...
一种基于随机突变与低温筛选的裂殖壶菌高产EPA的方法与应用
本发明属于微生物工程技术领域,公开了一种基于随机突变与低温筛选的裂殖壶菌高产二十碳五烯酸EPA的方法与应用,包括如下步骤:通过P2520启动子驱动G418抗性基因的过表达,构建随机插入突变体库,筛选获得基因组随机突变的裂殖壶菌突变株;涂布于...
一种亚麻籽甘油二酯油的酶法制备工艺
本发明涉及甘油二酯油制备技术领域,尤其涉及一种亚麻籽甘油二酯油的酶法制备工艺。本发明包括以下步骤:S1:以亚麻籽为原料,经冷压榨得到冷榨亚麻籽油;S2:对冷榨亚麻籽油进行叠式物理循环脱磷,循环时间2小时,脱磷后磷脂含量<8ppm;S3:酶促...
通过酶解制备具有改善高血栓功效的甘油二酯油的方法及其产品和应用
本发明提供了通过酶解制备具有改善高血栓功效的甘油二酯油的方法及其产品和应用,涉及酶法加工技术领域。甘油二酯油中的低芥酸菜籽二酯油、玉米二酯油均采用两次酶解和两次分子蒸馏法得到,两次酶解所使用的酶包括:脂肪酶和偏甘油酯脂肪酶;所述脂肪酶为3种...
一种利用雪莲菌制备有机硒的方法及其应用
本发明公开了一种利用雪莲菌制备有机硒的方法及其应用,属于有机硒制备技术领域。本发明提供的有机硒制备方法为:雪莲菌的接种量为2.5%,培养2h后加入无菌Na2SeO3溶液,Na2SeO3的工作浓度为25μg/mL,混匀后继续培养36h;采用本...
一种γ-氨基丁酸的制备方法及其应用
本发明涉及微生物发酵与饲料添加剂技术领域,具体而言,涉及一种γ‑氨基丁酸的制备方法及其应用。所述的γ‑氨基丁酸的制备方法,包括以下步骤:(a)将含有底物和枯草芽孢杆菌的混合液进行第一发酵反应,得到发酵物;(b)将含有所述发酵物和β‑葡聚糖酶...
一种利用沙漠链霉菌新种制备硫藤黄菌素的方法
本发明涉及一种利用沙漠链霉菌新种制备硫藤黄菌素的方法,包括以下步骤:⑴活化:将保藏于‑80℃的沙漠链霉菌新种Streptomyces sp. HMX112划线接种于酵母淀粉固体培养基上,于30℃培养14天,即得活化的纯培养菌株HMX112孢...
鲍鱼内脏多糖和多肽的联合制备方法及鲍鱼内脏多糖多肽组合物和应用
本发明属于生物技术领域,公开了一种鲍鱼内脏多糖和多肽的联合制备方法及鲍鱼内脏多糖多肽组合物和应用。本发明提供的鲍鱼内脏多糖和多肽的联合制备方法中,采用分阶段酶解和米曲霉发酵相结合的处理工艺,各个步骤共同构成一个有机整体,协同配合以实现对鲍鱼...
一种发酵羊栖菜多糖及其制备方法与应用
本发明公开了一种发酵羊栖菜多糖及其制备方法与应用,属于多糖深加工。该发酵羊栖菜多糖的分子量为11‑140kDa,岩藻糖含量为18wt%‑22wt%,葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸含量为55wt%‑62wt%;制备方法具体包括以下步骤:(1)以羊栖菜...
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