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一种微生物体内连续进化系统及其应用
本发明涉及一种微生物体内连续进化系统及其应用,属于生物技术领域。本发明基于CRISPR技术和T5DNA聚合酶突变体构建得到一种用于实现微生物定向进化的连续进化系统,系统元件包括nCas9蛋白、T5DNA聚合酶突变体和靶向目标序列的sgRNA...
一种抗抑制Taq DNA聚合酶及其应用
本发明公开了一种抗抑制Taq DNA聚合酶及其应用,涉及生物技术领域。其中,该抗抑制Taq DNA聚合酶通过在氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的野生型Taq DNA聚合酶的氨基酸序列上进行K206R、F667Y等氨基酸突变,获得一定程...
一种Taq DNA聚合酶突变体及其制备方法和应用
本发明一种Taq DNA聚合酶突变体及其制备方法和应用,涉及生物技术领域。所述Taq DNA聚合酶突变体为基于如SEQ ID NO.1所示的野生型Taq DNA聚合酶氨基酸序列的基础上的突变,且包含选自氨基酸突变L345E、L352D和S4...
一种高保真DNA聚合酶及其制备方法和应用
本发明公开了一种高保真DNA聚合酶及其制备方法和应用,涉及生物技术领域。本发明提供了一种高保真DNA聚合酶,所述的高保真DNA聚合酶为DNA结合蛋白与Pfu DNA聚合酶融合而成,所述DNA结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO : 3所...
一种热稳定性提高的PET水解酶突变体及其应用
本发明公开一种热稳定性提高的PET水解酶突变体及其应用,属于酶工程领域。本发明从HotPETase出发,基于深度学习的设计、酶工程优化及应用展开研究。模型预测并结合人工评估,选择了10个可能提升酶性能的待验证单点突变体,随后进行实验筛选验证...
一种脂肪酶突变体、固定化脂肪酶及其在制备维生素A棕榈酸酯中的应用
本发明公开了一种脂肪酶突变体、固定化脂肪酶及其在制备维生素A棕榈酸酯中的应用。所述脂肪酶突变体的氨基酸序列相对SEQ ID NO : 1具有选自G55V、S68A、S70A、P114T、D171P中的一个或多个氨基酸残基的差异。本发明的脂肪...
一种碱基编辑器及其应用
本发明公开了一种碱基编辑器及其应用,本发明提供了一种核酸碱基编辑器,具体而言是一种非基于CRISPR技术的碱基编辑器。所述碱基编辑器包括序列特异性DNA结合蛋白、切口酶、核酸外切酶、碱基特异性脱氨酶。该碱基编辑器具有单链特异性,且与传统的碱...
五种Cas13d核酸内切酶及其介导的RNA编辑系统
本发明公开了五种Cas13d核酸内切酶及其介导的RNA编辑系统。所述Cas13d核酸内切酶分别为Gs13d‑1、Gs13d‑2、Gs13d‑3、Gs13d‑4和Gs13d‑5,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、2、3、4、5所示,且...
一种绞股蓝葡萄糖苷酶及其水解的应用
本发明公开了一种绞股蓝葡萄糖苷酶,该绞股蓝葡萄糖苷酶通过包括以下步骤的制备方法获得:(1)在绞股蓝粗酶液中加入硫酸铵,搅拌混匀,得到硫酸铵饱和度为A1的第一混合溶液,静置,离心,得到第一上清液和第一沉淀;以及(2)在该第一上清液中加入硫酸铵...
一种α-L-鼠李糖苷酶突变体及其应用
本发明公开了一种α‑L‑鼠李糖苷酶突变体及其应用,属于基因工程及酶工程技术领域。所述α‑L‑鼠李糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示,其相对酶活达到野生型的1.46倍,有效解决了现有α‑L‑鼠李糖苷酶催化芦丁效率低、副产物...
一种泸定百合β-1, 3-葡聚糖酶基因LsGlu和应用
本发明涉及分子生物学技术领域,且公开了一种泸定百合β‑1, 3‑葡聚糖酶基因LsGlu和应用。本发明所述泸定百合LsGlu基因的CDS序列全长990bp,编码329个氨基酸,蛋白结构上包含N端信号肽和糖基水解酶17(GH17)结构域,通过P...
一种新型嗜热β-1, 4-内切甘露聚糖酶
本发明属于酶生化工程技术领域,具体涉及一种新型嗜热β‑1, 4‑内切甘露聚糖酶,所述酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,其最适反应温度为90℃至100℃,将所述嗜热β‑甘露聚糖酶施加于烟草物料,实现了在线添加—低温预催化—高温高效催...
一种不依赖外膜渗透剂的裂解革兰氏阴性细菌的肽融合抗生酶及其应用
本申请涉及抗生酶技术领域,提供了一种肽融合抗生酶,该肽融合抗生酶包括催化域LysS23、穿膜肽以及连接肽,所述催化域LysS23包括SEQ ID NO : 1所示的氨基酸序列,或将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经一个或几个氨基酸残基...
一种酶解丝素蛋白的酶及其制备方法与应用
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种酶解丝素蛋白的酶及其制备方法与应用。所述酶解丝素蛋白的酶的制备方法包括如下步骤:制备丝素蛋白微球;制备酶解丝素蛋白的酶。采用本发明方法制得的酶解丝素蛋白的酶具有性质稳定、易分离回收、重复利用率高等优点。将...
一种滑膜组织高质量单细胞的制备方法及应用
本发明涉及细胞生物学技术领域,尤其涉及一种滑膜组织高质量单细胞的制备方法及应用。所述制备方法中的酶解方法包括:采用混合酶对滑膜组织进行酶解,酶解至细胞数目满足要求;以重量份计,所述混合酶包括链霉蛋白酶1~3份、中性蛋白酶0.2~1份、胶原蛋...
一种基于聚谷氨酸亲和分离纯化沙雷溶素胞外金属蛋白酶的方法
本发明公开了一种基于聚谷氨酸亲和分离纯化沙雷溶素胞外金属蛋白酶的方法,属于生物工程技术领域。该方法利用沙雷溶素胞外金属蛋白酶含7个钙离子结合位点的特性,以聚谷氨酸作为特异性聚羧酸配体,通过钙离子介导的配位作用实现对目标蛋白酶的定向捕获,结合...
一种腈水解酶突变体及其在烟酸生物合成中的应用
本发明公开了一种腈水解酶突变体及其在烟酸生物合成中的应用,属于酶工程技术领域。本发明通过基于序列适应度的突变设计,构建了腈水解酶活性、热稳定性和可溶表达水平提高的腈水解酶突变体,突变体D1F4在50℃的半衰期可达123.40±5.94min...
一种硫酸软骨素ABCⅠ裂解酶突变体及其应用
本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种硫酸软骨素ABC I裂解酶、其突变体及其应用。本发明提供了硫酸软骨素ABC I裂解酶CSABC Ⅰ‑NS1,以及该酶的突变体CSABC Ⅰ‑NS1‑muaut。所述硫酸硫酸软骨素ABC I裂解酶CSA...
一种红没药醇合成酶突变体及其应用
本发明公开了一种红没药醇合成酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示或与SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种核酸分子、表达框、重组载体、重组菌。本发明还公开了上述重组菌的构建方法。本发明还公开了上述红没药醇合成酶突变体、...
一种二羟基酸脱水酶的纯化及酶活力测定方法
本发明公开了一种二羟基酸脱水酶的纯化及酶活力测定方法,属于酶活力测定技术领域。本发明公开的一种二羟基酸脱水酶的纯化及酶活力测定方法,创新性的以实验室还原法为基础,通过体外重构铁硫簇,纯化得到的二羟基酸脱水酶能够保持稳定酶活力。选择丙酮酸作为...
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