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  • 本发明公开了叶枝堆肥角质酶纽结及其应用,属于酶分子构建技术领域。所述叶枝堆肥角质酶纽结通过调整叶枝堆肥角质酶中各片段之间的连接顺序得到,从N端到C端包括依次连接的片段二、连接肽段一、片段一、连接肽段二、片段三;其中,片段一、片段二和片段三分...
  • 本发明提供一种催化生产尿苷酸的方法及应用,属于基因工程和微生物工程技术领域。本发明采用核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的尿苷激酶CaUDK‑F基因,采用大肠杆菌过量表达后,结合聚磷酸激酶PPK,进行生物催化底物尿苷,能够高效生产尿苷酸...
  • 本发明公开了一种适用于高温扩增的Phi29 DNA聚合酶突变体及其编码基因、基因工程菌构建方法与应用。所述Phi29 DNA聚合酶突变体为单点突变体,相较于野生型Phi29 DNA聚合酶,其在40℃‑70℃温度区间内的热稳定性显著提升。通过...
  • 本发明涉及生物催化技术领域,本发明公开了一种制备瑞鲍迪苷I的M88F突变体酶及其应用,所述酶由UGT76G1产生如下突变得到:M88F:UGT76G1的第88个氨基酸序列的蛋氨酸突变为苯丙氨酸;能将底物瑞鲍迪苷A (RA) 高效、定向地转化...
  • 本发明涉及生物催化技术领域,本发明公开了一种制备瑞鲍迪苷I的M88V突变体酶及其应用,所述酶由UGT76G1产生如下突变得到:M88V:UGT76G1的第88个氨基酸序列的蛋氨酸突变为缬氨酸。针对现有RA生物转化工艺中RI产率低、选择性差的...
  • 本发明涉及生物催化技术领域,本发明公开了一种制备瑞鲍迪苷I的M88A突变体酶及其应用,所述酶由UGT76G1产生如下突变得到:M88A:UGT76G1的第88个氨基酸序列的蛋氨酸突变为丙氨酸;其将RI的关键转化率从7%大幅提升至85%(提升...
  • 本发明涉及生物催化技术领域,本发明公开了一种制备瑞鲍迪苷I的L204A突变体酶及其应用,所述酶由UGT76G1产生如下突变得到:L204A:UGT76G1的第204个氨基酸序列的亮氨酸突变为丙氨酸;首次实现了瑞鲍迪苷I(RI)的高效体外酶法...
  • 本发明涉及生物催化技术领域,本发明公开了一种制备瑞鲍迪苷I的L379A突变体酶及其应用,所述酶由UGT76G1产生如下突变得到:第379个氨基酸序列的亮氨酸突变为丙氨酸;所述酶能够应用于RA体外转化制备利用价值更高的RI,转化率高于50%,...
  • 本发明涉及生物催化技术领域,本发明公开了一种制备瑞鲍迪苷I的M88W突变体酶及其应用,所述酶由UGT76G1产生如下突变得到:M88W:UGT76G1的第88个氨基酸序列的蛋氨酸突变为色氨酸;所述酶能够应用于RA体外转化制备利用价值更高的R...
  • 本发明公开了一种鼠李糖基转移酶突变体及其应用,属于基因工程技术领域。本发明通过蛋白质工程改造的方法提高了鼠李糖基转移酶的催化活性,从而提高了铜绿假单胞菌的鼠李糖脂产量,达到了62.87g·L‑1‑1,为野生型产量的1.89倍,具有良好的工业...
  • 本发明属于生物制药和生物转化领域,具体涉及一种淀粉蔗糖酶突变体、突变体编码基因、含有该突变体编码基因的重组载体、含有该突变体编码基因的重组基因工程菌以及淀粉蔗糖酶突变体在酶法制备(EE)‑白藜芦醇葡萄糖苷中的应用。本发明的淀粉蔗糖酶突变体表...
  • 本发明提供了一种重组大肠杆菌发酵生产糖基转移酶或蔗糖合酶的方法,属于生物发酵技术领域。本发明提供的发酵方法采用三阶段补料控制发酵策略,即发酵5小时后,开始进行补料操作,补料速度6.24‑7.20 g/L/h,发酵8‑10 h,降低补料速度至...
  • 本申请涉及L‑氨基酸脱氨酶,具体涉及L‑氨基酸脱氨酶突变体及应用。该突变体是相对于SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的酶产生的突变体。该突变体具有相对于SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的酶显著提高的酶活性。
  • 本发明公开了一种短链醇脱氢酶LkLkADH突变体、工程菌及在SS‑2‑羟基环己酮合成中的应用。本发明构建的短链醇脱氢酶突变体有效提高了底物的立体选择性及比酶活。突变体LkLkADH‑A145Q/G195L对1, 2‑环己二酮表现出严格的SS...
  • 本发明提供了一种高活性羰基还原酶突变体及其在合成系列度洛西汀中间体中的应用,所述突变体是将如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第138位和/或第195位进行单突变或多突变获得的。本发明构建了Mut‑A138V‑D195A重组还原酶突变体...
  • 本发明涉及一种新型醛酮还原酶以及单一酶法不对称合成高手性纯度含氮杂环醇的方法, 包括醛酮还原酶,该醛酮还原酶包括AKR1‑10中的任意一种或多种组合,所述的醛酮还原酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.10所示,本发明提...
  • 本发明公开了一种重组β‑胡萝卜素酮化酶及其突变体和应用,属于生物技术领域。本发明通过将来源于雨生红球藻的β‑胡萝卜素酮化酶HpCrtW中的第1‑134位氨基酸序列与来源于莱茵衣藻的β‑胡萝卜素酮化酶trCrCrtW中的第149‑328位氨基...
  • 本发明公开了一种异亮氨酸双加氧酶突变体,其氨基酸序列由SEQ IDNo.2所示氨基酸序列通过突变获得,并公开基于该突变体的全细胞多酶催化合成4‑羟基异亮氨酸的技术方法。本发明以廉价的L‑异亮氨酸和L‑谷氨酸钠为原料,采用全细胞催化的方式,在...
  • 本发明属于生物领域,具体涉及塞内卡病毒2B蛋白翻译阻滞位点突变的重组塞内卡病毒株的构建。本发明首次发现了2B蛋白的第26位赖氨酸(K)是抑制宿主蛋白翻译的关键位点,将2B蛋白的第26位K突变为丙氨酸(A)后,宿主蛋白翻译阻滞现象显著减弱;其...
  • 本发明公开了一种靶向软骨细胞的重组腺相关病毒及其制备方法,属于基因工程技术领域。重组腺相关病毒由重组质粒pSSCMV‑Col2a1‑SOX9与辅助质粒共转染HEK293细胞获得;重组质粒pSSCMV‑Col2a1‑SOX9是将Col2a1和...
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